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酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的分离纯化及其酶学性质
文献摘要：
为揭示酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的基本酶学性质,采用离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对菌株Bt028发酵液中的几丁质酶进行分离纯化鉴定,并考察该几丁质酶的最适温度、最适pH、催化动力学参数等性质.结果表明,Bt028菌株发酵液经离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析分离纯化后获得电泳纯几丁质酶比活力为681.78 U/mg,纯化倍数为3.21,回收率15.52％.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,几丁质酶的分子质量为65 kDa.酶学性质研究结果表明,该酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为6.5,在温度低于60℃、pH5.5～7.5时有较好的稳定性;Mg2+、Ca2+、Hg2+、Co2+对该酶活力有抑制作用,而Cu2+和Fe3+有一定的促进作用;低浓度的甲醇、乙醇、正丙醇和二甲亚砜使酶的活性增加,但当浓度继续增大,反而会抑制酶的活性;丙酮对几丁质酶有激活作用,而甲醛对几丁质酶有抑制作用.在最适催化条件下,几丁质酶催化反应的米氏常数Km、最大反应速率Vmax、酶的转换数Kcat分别为29.533 mg/mL、108.696μmoL/(L·min)和0.527/min.研究结果可为该酶的实际应用提供必要的工艺参数.
文献关键词：
酸橙;内生菌;几丁质酶;酶学性质;分离纯化
中图分类号：
作者姓名：
徐勤茜;朱国威;赵梓伶;陶雪婷;李子院;郝再彬;李海云
作者机构：
桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林 541004;广西高校食品安全与检测重点实验室,广西桂林 541004
文献出处：
引用格式：
[1]徐勤茜;朱国威;赵梓伶;陶雪婷;李子院;郝再彬;李海云-.酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的分离纯化及其酶学性质)[J].食品工业科技,2022(11):159-166
A类：
Bt028
B类：
酸橙,内生菌,Bacillus,thuringiensis,几丁质酶,分离纯化,酶学性质,硫酸铵,铵盐,盐析,葡聚糖凝胶,SDS,聚丙烯酰胺凝胶电泳,发酵液,纯化鉴定,催化动力学,动力学参数,层析分离,比活力,倍数,分子质量,kDa,反应温度,pH5,Mg2+,Ca2+,Hg2+,Co2+,酶活力,Cu2+,Fe3+,正丙醇,醇和,二甲亚砜,丙酮,甲醛,酶催化反应,Km,反应速率,Vmax,Kcat,moL
AB值：
0.288953
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