典型文献
几丁质裂解性多糖单加氧酶的表达及应用研究
文献摘要：
以具有几丁质降解能力菌株Chitiniphilus sp.LY72的裂解多糖单加氧酶(CsLPMO)为研究对象,在克隆CsLPMO全长基因的基础上对其进行生物信息学分析,利用3种表达质粒pET-22b、pET-28a和pCold,构建CsLPMO异源表达菌株EBL-22、EBL-28和EBL-Co.重组CsLPMO蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,筛选最佳表达质粒,对其表达条件进行优化.结果表明,CsLPMO是一种裂解性多糖单加氧酶,隶属于AA10家族.3株重组菌中,纯化重组酶蛋白相对含量分别为5.9％、4.1％、5.4％,比酶活力分别为155.42U/mg、80.26U/mg、148.29U/mg,因此,确定最佳质粒为pET-22b,菌株EBL-22表达条件为:OD600nm值至0.4时,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度为0.4mmol/L后,在25℃下诱导表达16 h.在优化条件下,其可溶性蛋白含量为928.32 mg/L,比酶活力为3.34 U/mL.CsLPMO的加入可使还原糖的产量提高1.67倍.
文献关键词：
几丁质;裂解性多糖单加氧酶;蛋白质表达;表达条件优化
中图分类号：
作者姓名：
徐倩倩;马春桐;姚莹莹;徐伟;周秀玲;张扬
作者机构：
聊城大学生命科学学院,山东 聊城252059
文献出处：
引用格式：
[1]徐倩倩;马春桐;姚莹莹;徐伟;周秀玲;张扬-.几丁质裂解性多糖单加氧酶的表达及应用研究)[J].中国酿造,2022(08):97-104
A类：
裂解性多糖单加氧酶,Chitiniphilus,LY72,裂解多糖单加氧酶,CsLPMO,AA10,42U
B类：
几丁质,降解能力,sp,全长,生物信息学分析,质粒,pET,22b,28a,pCold,异源表达,EBL,NTA,亲和层析,层析柱,十二烷基硫酸钠,聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS,PAGE,隶属于,株重,重组酶,白相,相对含量,比酶活,酶活力,26U,29U,OD600nm,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,4mmol,诱导表达,优化条件,可溶性蛋白,蛋白含量,还原糖,蛋白质表达,表达条件优化
AB值：
0.299938
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