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富脯氨酸胶原蛋白的重组表达及热稳定性研究
文献摘要：
细菌胶原蛋白制备工艺简单、成本低,在食品、医药材料等领域有着广泛的应用前景,但细菌胶原蛋白的热稳定性低,限制了其应用.该文以截短的酿脓链球菌胶原蛋白Scl2序列为研究对象,通过嵌合富脯氨酸序列,构建了表达高热稳定性重组胶原蛋白的大肠杆菌基因工程菌,并对重组菌株的发酵条件进行优化.结果 表明,在诱导菌体浓度为OD600值为2.5,发酵时间为24 h、诱导剂终浓度为1.0 mmol/L、诱导温度为35℃时,富脯氨酸胶原蛋白产量最高.通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和质谱鉴定,亲和纯化后获得高纯度胶原蛋白,圆二色谱实验证明所制备的胶原蛋白能正确折叠形成三股螺旋结构.在N端和C端同时嵌合富脯氨酸序列(Pro-Pro-Gly) 10的胶原蛋白的热稳定性提高最大,Tm值与原始胶原蛋白Sp2B相比提高了23℃,为设计高热稳定性的重组胶原蛋白材料提供了基础.
文献关键词：
胶原蛋白;异源表达;发酵优化;热稳定性;富脯氨酸
中图分类号：
作者姓名：
胡金远;乔士达;张萌;许菲
作者机构：
江南大学生物工程学院,江苏无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]胡金远;乔士达;张萌;许菲-.富脯氨酸胶原蛋白的重组表达及热稳定性研究)[J].食品与发酵工业,2022(05):15-22
A类：
Scl2,Sp2B
B类：
富脯氨酸,重组表达,热稳定性,稳定性研究,制备工艺,酿脓链球菌,嵌合,高热,重组胶原蛋白,大肠杆菌,基因工程菌,重组菌株,发酵条件,菌体,OD600,发酵时间,诱导剂,十二烷基硫酸钠,聚丙烯,凝胶电泳,sodium,dodecyl,sulfate,polyacrylamide,gel,electrophoresis,SDS,PAGE,质谱鉴定,亲和纯化,高纯度,圆二色谱,折叠,三股螺旋结构,Pro,Gly,Tm,异源表达,发酵优化
AB值：
0.330593
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