典型文献
有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究
文献摘要：
目的 挖掘可高效表达有机磷农药降解酶的基因,并构建含有该表达基因的工程菌,提供一种高效降解甲基对硫磷的新方法.方法 利用基因克隆获得高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,采用基因工程手段将其转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统,对毕赤酵母的发酵产物进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)定性和酶活定量研究,通过与目标底物甲基对硫磷反应,分析工程菌表达降解酶对甲基对硫磷的降解效果.结果 本研究成功克隆得到了高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,基因全长1000 bp,编码256个氨基酸,酶蛋白分子量为37 kD,并利用表达载体pPIC9K成功将其转化至毕赤酵母GS115.构建的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2表达有机磷农药降解酶活性为11.57 U/mL,对6.8 mg/L的甲基对硫磷降解效率为90％以上.结论 本研究得到的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2可高效表达有机磷农药降解酶,该酶活性高,对甲基对硫磷降解能力强,可有效应用于甲基对硫磷的降解.
文献关键词：
有机磷农药降解酶;基因克隆;表达载体;降解能力;甲基对硫磷
中图分类号：
作者姓名：
尚立成;水清照;李玲;寇宗红;刘兰霞
作者机构：
甘肃省兰州新区疾病预防控制中心,兰州 730000;甘肃省白银市疾病预防控制中心,白银 730900;兰州理工大学生命科学院,兰州 730000;甘肃省白银市食品检测检验中心,白银 730900;甘肃农业大学食品科学与工程学院,兰州 730000
文献出处：
引用格式：
[1]尚立成;水清照;李玲;寇宗红;刘兰霞-.有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究)[J].食品安全质量检测学报,2022(17):5688-5694
A类：
有机磷农药降解酶,Oph2
B类：
酶基因,甲基对硫磷,降解效果,高效表达,表达基因,工程菌,解甲,基因克隆,基因工程,毕赤酵母,Pichia,pastoris,表达系统,发酵产物,十二烷基硫酸钠,聚丙烯酰胺凝胶电泳,sodium,dodecyl,sulfate,polyacrylamide,gel,electrophoresis,SDS,PAGE,定量研究,标底,底物,全长,bp,分子量,kD,表达载体,pPIC9K,GS115,降解酶活性,降解效率,降解能力,有效应用
AB值：
0.236185
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