典型文献
米曲霉β-半乳糖苷酶的定向进化、高效表达及应用
文献摘要:
定向进化米曲霉β-半乳糖苷酶(AoBgal35A),以提高其水解乳糖的效率,通过易错PCR构建米曲霉β-半乳糖苷酶的突变体文库,高通量筛选水解乳糖效率高的突变体,将其在毕赤酵母中高效表达,并用于制备无乳糖牛奶.筛选得到一个正向突变体(mAoBga135A),经高密度发酵酶活力达4 760 U/mL.纯化后,mAoBga135A的最适pH和温度分别为5.0和55℃,比野生型AoBga135A分别提高了 0.5和降低了 5℃.mAoBga135A在室温下能高效水解牛奶中的乳糖,加酶量为2 U/mL时,水解72 h后牛奶中的乳糖质量浓度为0.38 g/dL,达到无乳糖牛奶标准.而野生型AoBgal35A的加酶量为20 U/mL时,在相同条件下水解后,乳糖质量浓度为0.6 g/dL.由此表明,定向进化明显提高了米曲霉β-半乳糖苷酶水解乳糖的效率,所得正向突变体在制备无乳糖乳品中具有很大的应用潜力.
文献关键词:
米曲霉;β-半乳糖苷酶;定向进化;高效表达;水解乳糖
中图分类号:
作者姓名:
李晨霞;向芷璇;李敬;江正强;闫巧娟;马俊文
作者机构:
中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083;中国农业大学工学院,北京100083
文献出处:
引用格式:
[1]李晨霞;向芷璇;李敬;江正强;闫巧娟;马俊文-.米曲霉β-半乳糖苷酶的定向进化、高效表达及应用)[J].食品与生物技术学报,2022(10):49-57
A类:
AoBgal35A,水解乳糖,mAoBga135A,AoBga135A
B类:
米曲霉,半乳糖,糖苷酶,定向进化,高效表达,易错,突变体,文库,高通量筛选,毕赤酵母,牛奶,选得,高密度发酵,酶活力,力达,野生型,dL,酶水解,乳品
AB值:
0.178569
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