典型文献
定向进化肌醇加氧酶MIOX4提高葡萄糖二酸的产量
文献摘要：
葡萄糖二酸是一种在医药、食品、服装纺织和化工均有重要作用的有机二元酸.葡萄糖二酸的生物合成途径已经在大肠杆菌、毕赤酵母和酿酒酵母细胞中成功构建.为了提高葡萄糖二酸合成关键酶-肌醇加氧酶MIOX4的活性,该研究以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为底盘微生物,通过定向进化-易错PCR的方法对来自拟南芥基因组的肌醇加氧酶MIOX4的关键氨基酸序列进行随机突变.以葡萄糖二酸的产量为筛选指标,利用大肠杆菌葡萄糖二酸传感器对MIOX4的突变体进行高通量筛选.实验结果显示,从突变体文库中筛到4株有潜力的MIOX4突变体(S133R、K88R、E72V、T40P),使得葡萄糖二酸产量相较于未突变菌株分别提高了53％、30％、21％、17％.通过对突变体MIOX4(S133R)进行结构分析,发现突变位点R133增大了该位点与底物肌醇之间的空间距离,从而减少了空间位阻,提高了对底物肌醇的催化能力.该研究为后续研究MIOX的结构和功能、以及进一步提高葡萄糖二酸产量奠定了基础.
文献关键词：
酿酒酵母;肌醇加氧酶MIOX4;葡萄糖二酸;易错PCR;生物传感器
中图分类号：
作者姓名：
苏蕊芳;李诗韵;毛银;赵运英;邓禹
作者机构：
江南大学,粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏 无锡,2141222;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,2141223;江南大学,江苏省生物活性产品加工工程研究中心,江苏 无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]苏蕊芳;李诗韵;毛银;赵运英;邓禹-.定向进化肌醇加氧酶MIOX4提高葡萄糖二酸的产量)[J].食品与发酵工业,2022(22):1-8
A类：
MIOX4,S133R,K88R,E72V,T40P,R133,MIOX
B类：
定向进化,肌醇,加氧酶,葡萄糖二酸,服装,纺织,二元酸,生物合成途径,大肠杆菌,毕赤酵母,酿酒酵母,酵母细胞,合成关键酶,Saccharomyces,cerevisiae,底盘,易错,拟南芥,氨基酸序列,筛选指标,突变体,高通量筛选,文库,突变位点,该位,底物,空间距离,空间位阻,结构和功能,生物传感器
AB值：
0.222996
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