典型文献
组合策略提高枯草芽孢杆菌漆酶在大肠杆菌中的胞外表达
文献摘要：
漆酶是一种多铜氧化酶,在食品、纺织、环境修复和造纸等领域有重要应用.为提高漆酶的发酵水平,该研究将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)来源的漆酶(CotA)表达于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,并分别考察了核糖体结合位点、诱导表达条件及共表达裂解蛋白对其表达效率的影响.结果显示,最优核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)重组菌CotA-RBS5胞内CotA表达水平达到1236 U/L,较优化前提高1.75倍.基于正交实验设计确定了最佳诱导表达条件为:待菌体浓度OD600达到0.8时,加入终浓度为2 mmol/L Cu2+及0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷后,于30℃诱导.在该条件下,重组菌CotA-RBS5的胞内酶活力提升至7926 U/L,较优化前提升了5.4倍;同时,胞外酶活力达到4984 U/L.共表达裂解蛋白E促进了细胞的裂解.在菌体浓度OD600达到3.5时诱导裂解蛋白E表达,胞外CotA酶活力在发酵30 h达到10283 U/L.研究结果将为漆酶的工业化生产提供了重要的基础数据.
文献关键词：
漆酶;枯草芽孢杆菌;大肠杆菌;核糖体结合位点;诱导条件;裂解蛋白
中图分类号：
作者姓名：
刘松;韩徐悦
作者机构：
江南大学 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏 无锡,214122;江南大学 未来食品科学中心,江苏 无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]刘松;韩徐悦-.组合策略提高枯草芽孢杆菌漆酶在大肠杆菌中的胞外表达)[J].食品与发酵工业,2022(17):8-15
A类：
CotA,核糖体结合位点,RBS5
B类：
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AB值：
0.293873
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