典型文献
枯草芽孢杆菌来源的碱性果胶酶在毕赤酵母中的高效表达
文献摘要：
以Bacillus subtilis 168来源的碱性果胶酶(PELA)为研究对象,首先采用毕赤酵母密码子偏好性优化,结合G418高浓度抗性筛选策略,构建了PELA突变体工程菌株Pp03;其次,通过信号肽(MF4I、HFBI、W1、Albumin、Invertase 2)优化和分子伴侣(BMH2、HAC1、PDI1、KEX2)共表达,获得一株高效表达PELA的工程菌株Pp13;接着对该菌株摇瓶表达PELA的诱导温度、甲醇添加量进行优化;最后,采用5L发酵罐进行高密度发酵.结果 显示,PELA的基因经过密码子、信号肽以及伴侣因子优化后,实现PELA的酶活分别提高至2.10、7.35、1.49倍,其酶活分别达到39.11、353.87、527.27U/mL;最佳诱导温度和甲醇添加量分别为26℃和1.0％;在最佳诱导条件下,PELA的摇瓶水平酶活达到732.60U/mL;采用5L发酵罐进行高密度发酵,PELA的酶活达到2301.05 U/mL.研究结果为碱性果胶酶的工业化应用提供理论依据,同时也为毕赤酵母中异源蛋白的高效表达提供方法参考.
文献关键词：
碱性果胶酶;毕赤酵母;信号肽;分子伴侣;高密度发酵
中图分类号：
作者姓名：
陈洲;王亚森;汪步青;许向阳;高晓冬;李子杰
作者机构：
江南大学生物工程学院,江苏无锡214122;枣庄市杰诺生物酶有限公司,山东枣庄277100
文献出处：
引用格式：
[1]陈洲;王亚森;汪步青;许向阳;高晓冬;李子杰-.枯草芽孢杆菌来源的碱性果胶酶在毕赤酵母中的高效表达)[J].食品科技,2022(02):1-9
A类：
碱性果胶酶,Pp03,MF4I,HFBI,Invertase,BMH2,HAC1,PDI1,KEX2,Pp13,27U,60U
B类：
枯草芽孢杆菌,毕赤酵母,高效表达,Bacillus,subtilis,PELA,密码子偏好性,G418,抗性筛选,筛选策略,突变体,工程菌株,信号肽,W1,Albumin,分子伴侣,共表达,一株,株高,摇瓶,5L,发酵罐,高密度发酵,过密,因子优化,活分,诱导条件,工业化应用,异源蛋白
AB值：
0.22827
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