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重组限制性内切酶Pst Ⅰ发酵条件优化
文献摘要：
由于限制性内切酶在重组表达时具有切割宿主DNA的细胞毒性,生产难度大,其供应一直被国外企业垄断.实验室前期通过广谱甲基化保护,初步实现了部分限制性内切酶的国产化,但工艺仍停留在低密度摇瓶培养水平,产量无法满足市场需求.研究以限制性内切酶PstⅠ为对象,通过单因素试验筛选了诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、补充碳源、pH值与诱导时机等多个发酵条件.结果 表明,在37℃下,开始发酵后6h,添加终浓度1.4 mmol/L IPTG进行诱导发酵8h,以甘油为补充碳源,控制发酵体系pH为8.0时PstⅠ的表达量最高,Pst Ⅰ蛋白产量为0.0129 g/L,为未优化的2.15倍,同时酶产率为1.926×106 U/L,为未优化的3.74倍.
文献关键词：
限制性内切酶;Pst Ⅰ;重组表达
中图分类号：
作者姓名：
张建;张新亚;李婷婷;罗志丹;许恒皓;卢辰
作者机构：
江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室(江苏海洋大学),江苏连云港,222005;江苏省海洋生物产业技术协同创新中心(江苏海洋大学),江苏连云港,222005;江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港,222005
文献出处：
引用格式：
[1]张建;张新亚;李婷婷;罗志丹;许恒皓;卢辰-.重组限制性内切酶Pst Ⅰ发酵条件优化)[J].食品与发酵工业,2022(05):100-105
A类：
B类：
组限,限制性内切酶,Pst,发酵条件优化,重组表达,宿主,细胞毒性,外企,广谱,甲基化,国产化,仍停留,摇瓶,单因素试验,诱导时间,诱导剂,碳源,始发,6h,IPTG,诱导发酵,8h,制发
AB值：
0.338425
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