典型文献
D-阿洛酮糖3-差向异构酶在大肠杆菌内的高效可溶性表达及发酵条件研究
文献摘要:
将来源于Clostridium bolteae ATCCBAA-613的DAEase基因序列经密码子优化合成,以pCold TF为表达载体,冷休克启动子CspA低温诱导DAEase基因在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,得到高效可溶性的重组Cb-DAEase并利用镍柱亲和层析分离纯化.结果表明,Cb-DAEase最适pH和温度为7.0和55℃,Co2+能够显著(P<0.05)增强酶活力.对培养条件进行优化得到,在7 g/L甘油、10 g/L酵母膏、1%接种量、0.25 mmol/L IPTG、诱导前培养5 h的条件下,Cb-DAEase活力达到(10.11±0.02)U/g,比优化前(1.38±0.01)U/g提高了7.33倍;以120 g/L的D-果糖为底物全细胞催化0.5 h后,D-阿洛酮糖产量为(11.47±0.04)g/L,比优化前(1.03±0.02)g/L提高了11.14倍.基于冷休克表达策略构建的重组菌经发酵优化后Cb-DAEase活力显著(P<0.05)提高,为高效制备D-阿洛酮糖提供了理论支持.
文献关键词:
D-阿洛酮糖3-差向异构酶;大肠杆菌;冷休克;可溶性表达;酶学性质;发酵优化
中图分类号:
作者姓名:
李秋凤;陈静;赵婧邑;韦欣;王志琦;刘继栋
作者机构:
广西大学轻工与食品工程学院,广西南宁 530004;广西农业科学院/广西南亚热带农业科学研究所,广西崇左 532415
文献出处:
引用格式:
[1]李秋凤;陈静;赵婧邑;韦欣;王志琦;刘继栋-.D-阿洛酮糖3-差向异构酶在大肠杆菌内的高效可溶性表达及发酵条件研究)[J].食品工业科技,2022(22):136-143
A类:
bolteae,ATCCBAA,DAEase,CspA
B类:
阿洛酮糖,差向异构,异构酶,大肠杆菌,可溶性表达,发酵条件,Clostridium,基因序列,经密,密码子优化,优化合成,pCold,TF,表达载体,冷休克,启动子,Escherichia,coli,BL21,DE3,Cb,亲和层析,层析分离,分离纯化,Co2+,酶活力,培养条件,酵母,接种量,IPTG,力达,果糖,底物,全细胞催化,糖产量,表达策略,策略构建,发酵优化,高效制备,酶学性质
AB值:
0.390494
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