典型文献
结核分枝杆菌转录调控蛋白Rv0827c(KmtR)调控靶点的初步研究
文献摘要：
结核分枝杆菌(MTB)通过转录调控系统快速适应宿主的防御系统与环境变化,从而形成持续感染,但其机制不明.为研究转录调控蛋白Rv0827c与通过细菌单杂交预测的23种基因的启动子DNA在体内与体外条件下的结合情况,明确Rv0827c与已确定基因rv3616c启动子结合的影响因素,本研究利用PCR从MTB H37Ra株基因组DNA中扩增rv0827c基因后构建重组质粒pET-22b-rv0827c,经IPTG诱导表达和纯化后获得重组蛋白Rv0827c(rRv0827c),同时以MTB H37Ra株基因组为模板扩增23种基因的启动子.通过体外凝胶迁移试验(EMSA)和体内染色质免疫共沉淀试验(ChIP)对rRv0827c与这23种基因启动子的相互作用及其互作区域进行检测,结果显示,rRv0827c与23种启动子DNA均能结合,且rRv0827c能够特异性地结合rv3616c(espA)启动子DNA,并结合于其大沟区域;通过EMSA对影响rRv0827c和rv3616c启动子DNA结合的金属离子进行筛选显示,Ni2+、Co2+在体外抑制rRv0827c与rv3616c启动子的结合,而Cr3+则促进二者的结合;表面等离子共振试验(SPR)也进一步验证rRv0827c能够特异性地结合rv3616c(espA)启动子DNA;利用MEME软件分析23种启动子DNA核苷酸序列的保守性,结果显示,4G和10G为rv3616c启动子DNA与rRv0827c互作的关键核苷酸位点.本研究首次揭示了 rRv0827c与多基因启动子DNA结合的广泛性,且直接调控rv3616c的表达,进而可能影响MTB的毒力.这对完善Rv0827c的调控网络及深入解析Rv0827c的调控功能奠定了理论基础.
文献关键词：
结核分枝杆菌;转录调控蛋白Rv0827c;rv3616c
中图分类号：
作者姓名：
王慧;崔莹莹;唐祎依;吕明月;党光辉;崔子寅;曹俊;宋宁宁;刘思国
作者机构：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队,黑龙江 哈尔滨 150069;潍坊医学院生命科学与技术学院,山东 潍坊 261053
文献出处：
引用格式：
[1]王慧;崔莹莹;唐祎依;吕明月;党光辉;崔子寅;曹俊;宋宁宁;刘思国-.结核分枝杆菌转录调控蛋白Rv0827c(KmtR)调控靶点的初步研究)[J].中国预防兽医学报,2022(08):823-830
A类：
Rv0827c,KmtR,rv3616c,rv0827c,rRv0827c,espA
B类：
结核分枝杆菌,转录调控,调控蛋白,MTB,调控系统,快速适应,宿主,防御系统,持续感染,过细,研究利用,H37Ra,重组质粒,pET,22b,IPTG,诱导表达,重组蛋白,凝胶迁移,迁移试验,EMSA,染色质免疫共沉淀,ChIP,基因启动子,大沟,金属离子,Ni2+,Co2+,体外抑制,Cr3+,表面等离子共振,SPR,MEME,保守性,4G,10G,酸位点,多基因,广泛性,毒力,调控网络,调控功能
AB值：
0.253196
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