典型文献
结核分枝杆菌Rv1886c蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备
文献摘要：
目的 表达、纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Rv1886c重组蛋白(Ag85B),并免疫小鼠制备多克隆抗体.方法 采用PCR技术从M.tb(H37Rv)基因组中扩增Rv1886c基因,克隆至pET-28a质粒中,构建重组表达质粒pET-28a-Rv 1886c,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达Ag85B蛋白,并对表达条件进行优化.采用Ni-NTA His亲和层析柱纯化目的 蛋白;将纯化的蛋白经皮下注射BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体滴度,Western blot法检测抗体特异性.结果 重组表达质粒pET-28a-Rv1886c经双酶切和测序鉴定证明构建正确;重组蛋白的最适表达条件为0.5 mmol/L IPTG 37℃诱导表达4h,获得了相对分子质量约30000的重组蛋白;纯化的重组蛋白纯度达90％以上,蛋白浓度约为1.5 mg/mL;免疫BALB/c小鼠后获得的抗Ag85B血清具有良好的抗原结合特性,且抗体滴度达1∶51200.结论 成功获得了高纯度的Rv1886c蛋白Ag85B,并制备了小鼠抗Ag85B多克隆抗体,为进一步研究TB的血清学早期诊断奠定了基础.
文献关键词：
结核分枝杆菌;Rv1886c基因;Ag85B;原核表达;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
刘琼;李慧;罗鹏征;马国荣;张炜;万巧凤
作者机构：
宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,宁夏银川750004
文献出处：
引用格式：
[1]刘琼;李慧;罗鹏征;马国荣;张炜;万巧凤-.结核分枝杆菌Rv1886c蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备)[J].中国生物制品学杂志,2022(01):63-67,73
A类：
Rv1886c,1886c
B类：
结核分枝杆菌,多克隆抗体,Mycobacterium,tuberculosis,tb,重组蛋白,Ag85B,H37Rv,pET,28a,质粒,重组表达,coli,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,NTA,His,亲和层析,层析柱,皮下注射,BALB,检测抗体,抗体滴度,blot,抗体特异性,双酶,4h,相对分子质量,蛋白纯度,蛋白浓度,抗原结合,结合特性,高纯度,TB,血清学,原核表达
AB值：
0.277247
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