典型文献
一种快速简便的伪狂犬病病毒EP0基因RT-qPCR检测方法的构建
文献摘要：
伪狂犬病病毒EP0基因编码区与病毒长的潜伏相关转录物(LLT)互补,这干扰了EP0基因表达的定量分析.本研究根据新近证实的EP0剪接体的序列,设计合成一对特异性引物,以GAPDH作为内参,建立一种SYBR Green实时荧光定量PCR检测EP0表达.提取PRV感染细胞的总RNA,分析了DNaseⅠ消化处理、不同反转录引物对检测结果的影响,并且利用该方法检测了EP0基因在感染细胞中的表达特征.结果显示:建立的RT-qPCR溶解曲线单一,且重复性好;PRV基因组DNA不影响RT-qPCR的检测,总RNA不经过DNaseⅠ消化可直接用于EP0的表达检测;随机引物比Oligo(dT)更适合用于反转录,能获得更灵敏的EP0检测结果;EP0基因在感染细胞8 h后表达量达到最高.小鼠三叉神经组织EP0定量检测发现LLT启动子缺失病毒与亲本病毒相比表达量明显降低.上述结果显示,本文成功建立了检测伪狂犬病病毒EP0基因快速简便的方法,为EP0基因的研究提供了有力手段.
文献关键词：
伪狂犬病病毒;EP0基因;RT-qPCR
中图分类号：
作者姓名：
张丽荣;阮可悦;童武;李国新;高飞;单同领;于海;童光志;郑浩
作者机构：
中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
文献出处：
引用格式：
[1]张丽荣;阮可悦;童武;李国新;高飞;单同领;于海;童光志;郑浩-.一种快速简便的伪狂犬病病毒EP0基因RT-qPCR检测方法的构建)[J].中国动物传染病学报,2022(04):81-86
A类：
EP0
B类：
速简,伪狂犬病病毒,qPCR,基因编码,编码区,转录物,LLT,究根,新近,剪接体,设计合成,特异性引物,GAPDH,内参,SYBR,Green,PRV,DNase,表达特征,不经,Oligo,dT,更灵,三叉神经,神经组织,定量检测,启动子,亲本,本病,文成
AB值：
0.247628
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