典型文献
分枝杆菌LY-1内源性表达元件的筛选及其在降低Cas9蛋白毒性中的应用
文献摘要：
[背景]分枝杆菌LY-1因能够将天然植物甾醇代谢转化为重要甾体药物中间体,目前已成为工业上的优势生产菌株.高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术是工业菌株代谢工程改造进行产量性状提升的关键.然而由于Cas9蛋白的高表达毒性问题且分枝杆菌中已公开报道的可用表达元件较少,极大地限制了Cas9蛋白在该菌株中的适度表达.[目的]筛选内源性表达元件,利用合适的表达元件启动Cas9蛋白的表达,降低其对菌株的毒性.[方法]依据文献和前期研究获得的分枝杆菌基因转录组水平数据,并结合启动子在线预测网站BDGP(),筛选内源性表达元件.以增强型绿色荧光蛋白作为报告基因对表达元件的强度进行评估,并采用不同强度的表达元件启动Cas9蛋白的表达.[结果]获得了23个不同表达强度的表达元件,采用中等强度的表达元件及弱表达元件都降低了Cas9蛋白对分枝杆菌LY-1的毒性,实现了Cas9蛋白在该菌株中的适度表达.[结论]建立了分枝杆菌LY-1内源性表达元件库,为后续菌株中高效CRISPR/Cas9基因编辑技术的构建及关键酶基因调控奠定了良好的基础.
文献关键词：
分枝杆菌;内源性表达元件;CRISPR/Cas9;增强型绿色荧光蛋白;基因表达与调控
中图分类号：
作者姓名：
薛苗苗;李会;曹雪岑;张晓梅;王淑丽;陈立营;史劲松;许正宏
作者机构：
江南大学生命科学与健康工程学院,江苏无锡214122;天津天药药业股份有限公司,天津300301;天津药业研究院股份有限公司,天津300301;江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122
文献出处：
引用格式：
[1]薛苗苗;李会;曹雪岑;张晓梅;王淑丽;陈立营;史劲松;许正宏-.分枝杆菌LY-1内源性表达元件的筛选及其在降低Cas9蛋白毒性中的应用)[J].微生物学通报,2022(08):3267-3278
A类：
内源性表达元件,BDGP
B类：
分枝杆菌,LY,Cas9,天然植物,植物甾醇,代谢转化,甾体,药物中间体,CRISPR,基因编辑技术,代谢工程改造,产量性状,前期研究,基因转录,转录组,启动子,在线预测,测网,增强型绿色荧光蛋白,报告基因,不同强度,中等强度,弱表达,元件库,关键酶基因,基因调控,基因表达与调控
AB值：
0.240233
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
