典型文献
海南黑山羊MBL2基因的转录调控元件的筛选与分析
文献摘要：
甘露聚糖结合凝集素C(mannose binding lectin C,MBL-C)是C型(Ca2+依赖型)凝集素超家族的成员,其作为一种急性期蛋白,具有抗细菌感染的功能,参与机体的天然免疫反应.为鉴定出结合在MBL2基因启动子区(1 009 bp)的重要转录因子,探寻该基因的转录调控机制,本研究选取海南黑山羊MBL2基因的启动子序列1 009 bp,采用DNA重组技术克隆6个转录起始位点上游1 009 bp的启动子5'端侧翼缺失序列,克隆片段经双酶切后连接至pGL3-Basic载体.重组质粒转染至293T细胞中,结合双荧光素酶活性检测系统筛选MBL2基因的核心启动子区域.通过在线生物信息学软件预测山羊MBL2基因的核心启动子区域的转录因子结合位点,利用点突变技术构建转录因子结合位点缺失的载体,转染293T细胞后结合双荧光素酶活性检测系统分析其转录活性.结果表明,海南黑山羊MBL2基因的核心启动子区域位于转录起始位点上游-304～-45 bp范围内,在线软件分析该区域存在RELA、NF-κB2、MZF1等3种转录因子结合位点.双荧光素酶报告分析结果表明,RELA和NF-κB2的结合位点缺失后均使山羊MBL2基因的转录活性极显著下降(P＜0.01).结果提示,RELA和NF-κB2对山羊MBL2基因的转录活性可能具有重要的正调控作用.该研究为进一步探寻海南黑山羊MBL2基因的功能提供理论依据.
文献关键词：
海南黑山羊;MBL2基因;转录调控;双荧光素酶;核心启动子
中图分类号：
作者姓名：
王雪梅;翟哲;陈巧玲;吴艳茹;吴昊天;黄惠娴;刘志勇;李崇瑞;满初日嘎;王凤阳;杜丽;陈思
作者机构：
海南大学动物科技学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口市动物基因工程重点实验室,海口 570228
文献出处：
引用格式：
[1]王雪梅;翟哲;陈巧玲;吴艳茹;吴昊天;黄惠娴;刘志勇;李崇瑞;满初日嘎;王凤阳;杜丽;陈思-.海南黑山羊MBL2基因的转录调控元件的筛选与分析)[J].畜牧兽医学报,2022(06):1795-1806
A类：
海南黑山羊,MZF1
B类：
MBL2,转录调控元件,甘露聚糖结合凝集素,mannose,binding,lectin,Ca2+,依赖型,超家族,急性期蛋白,抗细菌感染,天然免疫反应,基因启动子区,bp,转录调控机制,启动子序列,重组技术,转录起始位点,侧翼,失序,双酶,pGL3,Basic,重组质粒,质粒转染,293T,荧光素酶活性,活性检测,核心启动子,启动子区域,生物信息学软件,软件预测,转录因子结合位点,点突变,技术构建,转录活性,RELA,B2,双荧光素酶报告分析,正调控
AB值：
0.221906
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