典型文献
结核分枝杆菌Rv3873抗原的同源表达及其在结核病血清学诊断中的应用
文献摘要：
目的 在耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Msm)中克隆并表达结核分枝杆菌(M.tuberculosis,Mtb)RD1区蛋白Rv3873,并评价其在结核病(tuberculosis,TB)血清学诊断中的价值.方法 以Mtb H37Rv标准株全基因组DNA为模板,扩增得到rv3873基因完整序列,克隆至分枝杆菌表达载体pMF406,构建重组质粒pMF406-rv3873,电转化至Msm mc2155,加入乙酰胺诱导表达Rv3873同源重组蛋白(mRv3873),利用亲和层析进行纯化,Western blot分析抗原特异性;ELISA法检测27份TB患者和31份健康者血清IgG抗体,以大肠埃希菌表达的Rv3873(rRv3873)和免疫优势抗原Ag85A作为对照抗原,评价mRv3873在TB血清学诊断中的作用.结果 在Msm中成功表达了重组Mtb蛋白mRv3873,主要以可溶形式存在,经Ni2+亲和层析柱纯化可获得高纯度(95％)的可溶性重组蛋白,蛋白浓度约为2.0 mg/mL;TB患者组血清中抗mRv3873和Ag85A抗原特异性IgG水平均显著高于健康组(P＜0.05),而两组血清rRv3873特异性IgG水平差异无统计学意义(P＞0.05);mRv3873抗原与对照抗原Ag85A的诊断效能相当,ROC曲线下面积分别为0.776 0和0.778 4,显著高于异源表达抗原rRv3873的曲线下面积(0.586 6).结论 在快速生长分枝杆菌Msm中可高水平表达并纯化MtbRD1区抗原Rv3873,较之异源表达抗原,TB患者产生针对mRv3873的IgG水平显著高于健康人群,分枝杆菌同源表达的mRv3873具有作为TB血清诊断的潜力.
文献关键词：
结核分枝杆菌;RD1区抗原;同源表达;结核病;血清学诊断
中图分类号：
作者姓名：
顾雯菲;吴娟;胡志东;范小勇
作者机构：
温州医科大学检验医学院生命科学学院,浙江温州325035;上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心,上海201508
文献出处：
引用格式：
[1]顾雯菲;吴娟;胡志东;范小勇-.结核分枝杆菌Rv3873抗原的同源表达及其在结核病血清学诊断中的应用)[J].中国生物制品学杂志,2022(09):1069-1075
A类：
Rv3873,rv3873,pMF406,mc2155,mRv3873,rRv3873,MtbRD1
B类：
结核分枝杆菌,同源表达,结核病,血清学诊断,耻垢分枝杆菌,Mycobacterium,smegmatis,Msm,tuberculosis,TB,H37Rv,标准株,全基因组,表达载体,重组质粒,电转化,乙酰胺,诱导表达,同源重组,重组蛋白,亲和层析,blot,健康者,IgG,大肠埃希菌,免疫优势,Ag85A,Ni2+,层析柱,高纯度,蛋白浓度,诊断效能,异源表达,速生,较之,健康人群
AB值：
0.204265
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
