为了解猪miR-23a-27a-24簇的序列及结构特征,分析其在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用,采用测序技术获得猪miR-23a-27a-24簇前体序列;利用生物信息学方法分析miR-23a-27a-24簇的序列信息、结构和生物学功能;使用双酶切法构建猪miR-23a-27a-24簇的过表达载体,转染至体外培养的猪卵巢颗粒细胞中,qRT-PCR检测过表达效果;通过流式细胞术检测颗粒细胞凋亡率.结果显示:猪miR-23a-27a-24簇前体序列长度为408 bp,核苷酸序列与其他哺乳动物的一致性较高;哺乳动物miR-23a-27a-24簇均位于基因组中ZSWIM和miR-181c基因之间,成员转录顺序相同、间距相近;功能富集分析发现,miR-23a-27a-24簇的靶基因主要富集于RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控的生物学过程和PI3K-Akt信号通路中;成功构建猪miR-23a-27a-24簇的过表达载体,且在猪卵巢颗粒细胞中高效表达;流式细胞术分析发现,转染miR-23a-27a-24簇过表达载体能够显著提高颗粒细胞的凋亡率(P＜0.05),极显著提高颗粒细胞早期凋亡率(P＜0.01).结果表明miR-23a-27a-24簇能够促进猪卵巢颗粒细胞凋亡.

猪;卵巢颗粒细胞;细胞凋亡;miR-23a-27a-24簇

王思琪;张卓凡;杨柳;杜星;吴望军;李齐发

南京农业大学动物科技学院,江苏南京 210095

畜牧与兽医

[1]王思琪;张卓凡;杨柳;杜星;吴望军;李齐发-.miR-23a-27a-24簇在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用)[J].畜牧与兽医,2022(04):1-9

ZSWIM

miR,23a,27a,卵巢颗粒细胞凋亡,技术获得,利用生物,生物信息学方法,序列信息,生物学功能,双酶,过表达载体,转染,体外培养,qRT,表达效果,过流,流式细胞术,细胞凋亡率,bp,哺乳动物,181c,功能富集分析,靶基因,启动子,正调控,生物学过程,PI3K,Akt,高效表达

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