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牛ADIG基因启动子转录调控分析
文献摘要：
旨在构建脂肪生成素基因(adipohenin,ADIG)在牛不同组织中的表达谱,鉴定其核心启动子区域及关键转录因子,以期阐明其转录调控的分子机制.本研究采集3头((24±2)月龄)健康南阳公牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组织中ADIG基因的相对表达量;克隆获得牛ADIG基因上游启动子区2 245 bp序列,构建6个pGL3-WT,与pRL-TK共转染293T细胞、原代脂肪细胞和3T3-L1细胞,进一步利用生物信息学预测其核心启动子区的关键转录因子.结果发现,ADIG基因在南阳牛肺(P＜0.05)、肾(P＜0.05)和皮下脂肪(P＜0.05)组织中高表达;克隆得到2 245 bp及其6段缺失片段序列的ADIG基因的启动子序列,成功构建了pADIG-1 621/+59、pADIG-1 288/+59、pADIG-850/+59、pADIG-589/+59、pADIG-321/+59和 pADIG-79/+59双荧光素酶报告载体,并检测到牛ADIG基因启动子核心区域在-321/-79;生物信息学初步预测牛ADIG基因核心区域含有C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子结合位点.综上,牛ADIG基因在皮下脂肪组织中表达量最高,其启动子核心区位于-321/-79,C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子对ADIG基因转录活性具有调控作用.本研究结果为探究ADIG基因在肉牛分子水平上的改良培育提供理论依据.
文献关键词：
南阳牛;ADIG基因;启动子;转录调控;双荧光素酶报告基因
中图分类号：
作者姓名：
唐林;魏大为;汪书哲;雷召雄;高晓茜;王兴平;马燕芬;马云
作者机构：
宁夏大学农学院宁夏回族自治区反刍动物分子细胞育种重点实验室,银川750021
文献出处：
引用格式：
[1]唐林;魏大为;汪书哲;雷召雄;高晓茜;王兴平;马燕芬;马云-.牛ADIG基因启动子转录调控分析)[J].畜牧兽医学报,2022(03):722-730
A类：
ADIG,adipohenin,pADIG,+59
B类：
基因启动子,转录调控,脂肪生成,生成素,不同组织,表达谱,核心启动子,启动子区域,关键转录因子,月龄,康南,公牛,皮下脂肪组织,逆转录,聚合酶链反应,reverse,transcription,polymerase,chain,reaction,相对表达量,bp,pGL3,WT,pRL,TK,共转染,293T,原代,脂肪细胞,3T3,L1,利用生物,南阳牛,段序列,启动子序列,双荧光素酶报告载体,子核,核心区域,EBP,PPAR,CREB,STAT5,AP,转录因子结合位点,组织中表达,基因转录,转录活性,肉牛,分子水平,双荧光素酶报告基因
AB值：
0.277963
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