[背景]细菌应对环境压力的能力对其存活和增殖及引起感染具有重要意义.充分揭示布鲁氏菌应激机制,可为防控布鲁氏菌病提供理论依据.研究发现,ycjX基因在细菌热应激时高表达且可能受σ32调节,ycjF基因在细菌败血症期间表达显著上升,二者在革兰阴性菌中可能构成操纵子.[目的]研究ycjX和ycjF基因在布鲁氏菌热应激中的作用.[方法]对布鲁氏菌(Brucella)及其ycjX和ycjF双基因缺失株(ΔycjXF)和回补株(CΔycjXF)进行热应激试验,计算3株菌的存活率.利用RT-PCR和β-半乳糖苷酶活性检测试验鉴定ycjX和ycjF的操纵子模式和启动子区域活性.利用ChIP试验分析σ32与ycjX和ycjF的靶向调节关系.表达并纯化pGEX-4T-1-σ32重组蛋白,凝胶电泳迁移试验分析σ32与ycjX和ycjF之间的结合关系.[结果]热刺激后ΔycjXF存活显著低于Brucella suis S2和CΔycjXF.明确布鲁氏菌ycjX和ycjF为同一转录本,确定其启动子区域具有活性.ChIP试验表明,σ32可靶向富集在ycjXF启动子区,凝胶电泳迁移试验确定σ32可与ycjXF 体外直接结合.[结论]在σ32的调节下,ycjX和ycjF在布鲁氏菌热应激中发挥正向作用.

布鲁氏菌;ycjX;ycjF;双基因缺失株;σ32因子;热应激

陈家露;支飞杰;李胜男;王萍萍;李彬;刁梓洋;靳亚平;王爱华

西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;农业农村部动物生物技术重点实验室,陕西杨凌712100

微生物学通报

[1]陈家露;支飞杰;李胜男;王萍萍;李彬;刁梓洋;靳亚平;王爱华-.ycjX和ycjF基因在布鲁氏菌热应激中的作用)[J].微生物学通报,2022(12):5159-5170

ycjX,ycjF,双基因缺失株,ycjXF

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