典型文献
黄酒酵母β-苯乙醇合成途径醇脱氢酶I的异源表达及酶学特性
文献摘要：
醇脱氢酶I(Adh1p)是黄酒酵母艾利希途径最后合成β-苯乙醇的一个关键酶.为探究黄酒酵母Adh1p的差异及酶学特性,以工业生产菌株黄酒酵母HJ和模式菌株酿酒酵母S288C的基因组为模板,设计引物PCR扩增醇脱氢酶编码区基因ADH1,构建pET-28a(+)表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达获得Adh1p.通过超声破碎菌体后获取粗酶液,亲和层析纯化后获取纯酶,进而探究酶学特性.以苯乙醛为底物,酶活性测定表明:来自黄酒酵母的Adh1pHJ纯酶的酶活(231.51 U/g)比来自酿酒酵母的Adh1pS288C(203.48 U/g)高13.79％,且Adh1pHJ的Km值(0.524μmol/L)小于Adh1pS288C的Km值(0.759μmol/L),表现为Adh1pHJ与底物的亲和力更大.从kcat/Km值发现Adh1pHJ(0.406 L/(μmol·min))的催化效率更高.Adh1pHJ耐受β-苯乙醇和乙醇的能力较高于Adh1pS288C.本研究结果为Adh1p的结构以及酶学性质分析提供方法和理论依据,同时也对β-苯乙醇工业生产开发提供借鉴.
文献关键词：
醇脱氢酶I;异源表达;酶学性质;黄酒;黄酒酵母
中图分类号：
作者姓名：
杨琪琳;刘双平;赵禹宗;孙海龙;毛健
作者机构：
江南大学食品学院粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心 江苏无锡 214122;江南大学江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心 江苏无锡 214122;江南大学江苏省食品安全与质量控制协同创新中心 江苏无锡 214122;江南大学(绍兴)产业技术研究院 浙江绍兴 312000;国家黄酒工程技术研究中心 浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司 浙江绍兴 312000
文献出处：
引用格式：
[1]杨琪琳;刘双平;赵禹宗;孙海龙;毛健-.黄酒酵母β-苯乙醇合成途径醇脱氢酶I的异源表达及酶学特性)[J].中国食品学报,2022(06):83-94
A类：
黄酒酵母,Adh1p,Adh1pHJ,Adh1pS288C
B类：
苯乙,合成途径,醇脱氢酶,异源表达,酶学特性,后合成,关键酶,酿酒酵母,引物,编码区,ADH1,pET,28a,质粒,大肠杆菌,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,超声破碎,菌体,粗酶液,亲和层析,层析纯化,乙醛,底物,酶活性测定,比来,自酿,Km,亲和力,kcat,催化效率,醇和,酶学性质分析,生产开发
AB值：
0.254096
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