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典型文献
黑曲霉果胶酯酶在毕赤酵母中异源表达、性质分析及脱酯工艺优化
文献摘要:
果胶酯酶作为一种食品酶制剂,因其能够将高酯果胶的甲酯基脱去生成低酯果胶而受到广泛关注,但目前国内尚无自主研发的商品果胶酯酶.为了促进果胶酯酶的应用,该研究合成了密码子优化后的黑曲霉果胶酯酶基因,并实现了其在毕赤酵母X33中成功表达.3 L发酵罐高密度发酵96 h后,得到的发酵液上清液中果胶酯酶的活力为85.12 U/mL,是摇瓶水平的7倍,也是目前果胶酯酶表达的最高水平.对重组果胶酯酶进行分离纯化和酶学性质研究,结果表明,重组果胶酯酶的最适pH和最适温度分别是pH 5.0和55℃,Km和Vmax分别是13.8mmol/L和9.04 μmol/(L·min).该酶的温度稳定性较好,在55℃处理40 min,剩余活力仍保持在60%以上;其pH耐受范围广,在pH 3.5~6.5下处理120 min,仍保持60%以上的剩余活力.以高酯果胶为底物,对该果胶酯酶的脱酯条件进行优化,优化得到的脱酯工艺参数为:30 g/L果胶、加酶量65.4 U/g、脱酯温度50℃、初始pH5.5、脱酯时间60 min.在此条件下果胶的酯化度从70.8%降至13.6%.该研究重组表达得到的果胶酯酶具有良好的pH稳定性和热稳定性,在低酯果胶的工业生产方面具有良好的应用前景.
文献关键词:
果胶酯酶;毕赤酵母;异源表达;高密度发酵;酶学性质;脱酯
作者姓名:
孙莹;吴丹;郑璞;陈鹏程
作者机构:
江南大学生物工程学院,江苏无锡,214122
文献出处:
引用格式:
[1]孙莹;吴丹;郑璞;陈鹏程-.黑曲霉果胶酯酶在毕赤酵母中异源表达、性质分析及脱酯工艺优化)[J].食品与发酵工业,2022(21):17-23
A类:
B类:
黑曲霉,果胶酯酶,毕赤酵母,异源表达,性质分析,脱酯,酶制剂,高酯果胶,甲酯,酯基,脱去,低酯果胶,密码子优化,酶基因,X33,发酵罐,高密度发酵,发酵液,上清液,摇瓶,分离纯化,酶学性质,Km,Vmax,8mmol,温度稳定性,耐受范围,下处,底物,pH5,此条,酯化,重组表达,热稳定性
AB值:
0.284848
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