典型文献
腈水合酶底物通道入口调控催化活性的关键氨基酸位点的定位与改造
文献摘要：
腈水合酶(nitrile hydratase,NHase,EC 4.2.1.84)是一种催化腈类化合物生成酰胺类化合物的金属酶,工业上用于生物法生产丙烯酰胺和烟酰胺.由于腈类的水合反应是放热反应,工业上对腈水合酶的热稳定性较为关注.该实验室此前通过基因挖掘获得了具有高热稳定性的温泉热碱芽孢杆菌(Caldalkalibacillus thermarum TA2.A1)来源的腈水合酶,但其活性与工业生产要求有较大的差距,因此,提高该来源腈水合酶的酶活力具有重要意义.该研究采用分子动力学模拟的方法,通过对β亚基上位于腈水合酶底物通道入口的N47和N181这2个位点进行代表性氨基酸突变,破坏氢键,提高底物通道入口柔性,增强通道入口构象可变性,继而提高酶促反应催化效率.研究得到了最优突变体βN47F,与野生型酶相比,催化丙烯腈的比酶活力提高了2.57倍,且保持了良好的热稳定性,为工业化应用奠定了坚实的基础.
文献关键词：
腈水合酶;丙烯酰胺;分子动力学模拟;酶活力
中图分类号：
作者姓名：
张苇苗;程中一;周丽;周哲敏
作者机构：
江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]张苇苗;程中一;周丽;周哲敏-.腈水合酶底物通道入口调控催化活性的关键氨基酸位点的定位与改造)[J].食品与发酵工业,2022(09):8-13
A类：
腈水合酶,NHase,Caldalkalibacillus,thermarum,N47,N181,N47F
B类：
酶底物,底物通道,催化活性,关键氨基酸位点,nitrile,hydratase,EC,酰胺类,胺类化合物,金属酶,生物法,丙烯酰胺,烟酰胺,水合反应,放热反应,热稳定性,此前,基因挖掘,高热,温泉,芽孢杆菌,TA2,A1,酶活力,分子动力学模拟,亚基,上位,个位,氨基酸突变,氢键,构象,可变性,酶促反应,催化效率,突变体,野生型,丙烯腈,比酶活,工业化应用
AB值：
0.329903
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