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基于热不稳定区段分析和二硫键预测的玉米赤霉烯酮脱毒酶ZLHY-6热稳定性改造
文献摘要：
目的 基于热不稳定区段分析和二硫键预测,探索定点突变改造提高ZLHY-6的热稳定性的可行性.方法 基于分子动力学模拟设计两个策略以提高ZLHY-6的热稳定性.策略一:寻找ZLHY-6热不稳定区段,对区段内氨基酸进行计算机虚拟饱和突变,根据突变自由能变(ΔG)筛选结果选取了10个突变体.策略二:通过预测,在ZLHY-6分子内引入二硫键,每个突变体引入1对,共计5个突变体.结果 突变体H134W和Q45C/A253C在45℃热处理20 min后,其相对酶活分别为野生型的10倍和3.1倍,并保留了对ZEN一定的活性(41.33％、102.67％).通过分子动力学分析和结构模拟发现,突变的引入可能削弱了构象的波动性,提升了结构刚性,从而提升了蛋白的热稳定性.结论 热不稳定氨基酸突变和二硫键构建在脱毒酶ZLHY-6改造上具有可行性,ZLHY-6热稳定性的增强提高了其在工业上的应用潜力,这一结果也为探索酶的计算机辅助手段改造提供策略基础.
文献关键词：
玉米赤霉烯酮;脱毒酶ZLHY-6;热稳定性;定点突变;分子动力学模拟;热不稳定区段;二硫键
中图分类号：
作者姓名：
杜昊澜;骆树娟;Tosin Victor Adegoke;刘阳;邢福国;高吉慧;郑永权
作者机构：
中国农业科学院农产品加工研究所, 农业农村部农产品质量安全收贮运管控重点实验室, 北京 100193;佛山科学技术学院食品科学与工程学院, 全国名特优新农产品全程质量控制技术佛山中心, 佛山 528231;中国农业大学食品科学与营养工程学院, 植物源功能食品北京市重点实验室, 北京 100083;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193
文献出处：
引用格式：
[1]杜昊澜;骆树娟;Tosin Victor Adegoke;刘阳;邢福国;高吉慧;郑永权-.基于热不稳定区段分析和二硫键预测的玉米赤霉烯酮脱毒酶ZLHY-6热稳定性改造)[J].食品安全质量检测学报,2022(22):7150-7157
A类：
热不稳定区段,ZLHY,H134W,Q45C,A253C
B类：
二硫键,玉米赤霉烯酮,脱毒,热稳定性,定点突变,分子动力学模拟,模拟设计,计算机虚拟,饱和突变,自由能,突变体,热处理,活分,野生型,ZEN,动力学分析,结构模拟,构象,波动性,氨基酸突变,建在,计算机辅助手段
AB值：
0.176681
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