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嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL保守基序中关键氨基酸残基对其催化性质的影响
文献摘要：
对嗜热酸性m型普鲁兰水解酶TK-PUL保守基序中非保守氨基酸残基进行定点突变,通过比较TK-PUL与突变体的酶学性质,确定保守基序中关键氨基酸残基对其催化性质的影响.TK-PUL保守基序II中I500W位点变化不影响其最适反应pH值、pH值稳定性、最适反应温度、热稳定性,但使其a-淀粉酶活性和普鲁兰酶活性均明显降低.动力学常数测定结果显示,突变体I500W以麦芽三糖为底物的kcat/Km值基本不变,以异潘糖为底物的kcat/Km值约为TK-PUL的64.78％.结果表明,TK-PUL保守基序II中第500位氨基酸残基Ile对其水解糖苷键的偏好性起到重要作用.TK-PUL中I500W位点变化不影响其a-l,4-糖苷键水解活性,但使其α-1,6-糖苷键水解活性明显降低.本研究有助于深入理解TK-PUL的双功能催化机制,也可为TK-PUL的分子改造提供理论依据和设计思路.
文献关键词：
III型普鲁兰多糖水解酶;保守基序;定点突变;催化活性;同源模建
中图分类号：
作者姓名：
曾静;何础阔;郭建军;侯安伟;聂俊辉;袁林
作者机构：
江西省科学院微生物研究所,江西南昌 330096;海南大学食品科学与工程学院,海南海口 570228
文献出处：
引用格式：
[1]曾静;何础阔;郭建军;侯安伟;聂俊辉;袁林-.嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL保守基序中关键氨基酸残基对其催化性质的影响)[J].食品科学,2022(22):113-120
A类：
I500W
B类：
嗜热,普鲁兰多糖,糖水,水解酶,TK,PUL,保守基序,氨基酸残基,催化性质,定点突变,突变体,酶学性质,反应温度,热稳定性,淀粉酶活性,普鲁兰酶,动力学常数,测定结果,麦芽,底物,kcat,Km,Ile,糖苷键,偏好性,水解活性,双功能催化,催化机制,分子改造,III,催化活性,同源模建
AB值：
0.248441
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