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交替糖蔗糖酶在毕赤酵母中的重组表达、酶学性质及转化反应研究
文献摘要：
交替糖作为一种新型功能性低聚糖具有良好的益生作用.交替糖在自然界中的含量较少,主要通过发酵法和酶法制备,但目前交替糖蔗糖酶(alternansucrase,ASR)活性较低成为制约交替糖应用的主要因素.为促进交替糖的应用,该研究合成了密码子优化后的交替糖蔗糖酶基因,将其首次在毕赤酵母GS115中成功重组表达.3 L发酵罐高密度发酵72 h结果显示,重组菌发酵上清液中ASR酶活力为34.5 U/mL,约是摇瓶水平的12倍,也是目前重组ASR的最高表达水平.酶学性质研究表明,重组ASR的最适pH和最适温度分别是pH 6.0和55℃,Km和kcat分别是31.97 mmol/L,0.36 s-1.以蔗糖、蔗糖和麦芽糖等其他小分子糖为底物,在40℃,pH 5.5条件下利用重组ASR制备交替糖.将催化产物经薄层色谱初步分析,鉴定得出催化产物中生成了大量交替糖寡糖和交替糖多糖.该研究首次实现了交替糖蔗糖酶基因在毕赤酵母中高水平重组表达,并催化制备了交替糖,为ASR的异源表达及规模化制备交替糖提供了良好基础.
文献关键词：
交替糖蔗糖酶;毕赤酵母;异源表达;高密度发酵;催化反应;交替糖
中图分类号：
作者姓名：
戴悦;吴丹;郑璞;陈鹏程
作者机构：
江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]戴悦;吴丹;郑璞;陈鹏程-.交替糖蔗糖酶在毕赤酵母中的重组表达、酶学性质及转化反应研究)[J].食品与发酵工业,2022(17):29-34
A类：
交替糖,交替糖蔗糖酶,alternansucrase
B类：
毕赤酵母,重组表达,酶学性质,功能性低聚糖,益生作用,发酵法,酶法制备,ASR,密码子优化,酶基因,GS115,发酵罐,高密度发酵,发酵上清液,酶活力,摇瓶,Km,kcat,麦芽糖,小分子糖,底物,下利,催化产物,薄层色谱,初步分析,寡糖,中高水,异源表达,规模化制备,良好基础,催化反应
AB值：
0.219129
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