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典型文献
米黑根毛霉甘露聚糖酶的定向进化、高效表达与应用
文献摘要:
为提高米黑根毛霉甘露聚糖酶(RmMan5A)对魔芋粉的水解效率,利用定向进化技术对该酶进行分子改造,经两轮筛选获得了一个对甘露聚糖酶催化效率显著提升的突变体(RmMan5AM2).该突变体的最适pH为7.0,最适温度为65℃,较野生型甘露聚糖酶提高了 10℃.该突变体继承了野生型甘露聚糖酶的高比酶活力,对槐豆胶的比酶活力达10 371.4 U/mg.在最适条件下,该突变体对槐豆胶、魔芋粉和瓜尔胶的催化效率分别提高了 37.4%、28.9%和34.4%.进一步将该突变体在毕赤酵母中进行高效表达,经过156 h高密度发酵,发酵液胞外酶活力达176 000 U/mL,是目前产甘露聚糖酶的最高水平.利用该突变体水解魔芋粉成功制备魔芋甘露寡糖,产物主要为聚合度2-6的甘露寡糖(相对峰面积>85%),总得率为88.5%.该突变体具有优良的酶学性质,对魔芋粉的水解效率显著提升,在魔芋甘露寡糖的酶法制备中具有很大的应用潜力.
文献关键词:
米黑根毛霉;甘露聚糖酶;定向进化;高效表达;应用
作者姓名:
李延啸;马俊文;闫巧娟;武建;张伟;江正强
作者机构:
中国农业大学工学院/中国轻工业食品生物工程重点实验室,北京100083;北京瓜尔润科技股份有限公司,北京100101;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083;南京财经大学食品科学与工程学院/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心,江苏南京210023
引用格式:
[1]李延啸;马俊文;闫巧娟;武建;张伟;江正强-.米黑根毛霉甘露聚糖酶的定向进化、高效表达与应用)[J].食品与生物技术学报,2022(07):120-129
A类:
RmMan5A,RmMan5AM2
B类:
米黑根毛霉,甘露聚糖酶,定向进化,高效表达,魔芋粉,分子改造,两轮,酶催化,催化效率,突变体,野生型,比酶活,酶活力,槐豆,力达,和瓜,瓜尔胶,毕赤酵母,高密度发酵,发酵液,胞外酶,甘露寡糖,聚合度,峰面积,总得,得率,酶学性质,酶法制备
AB值:
0.226169
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