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典型文献
羊口疮病毒115基因的克隆及原核表达
文献摘要:
[目的]获得羊口疮病毒(ORFV)115基因表达蛋白.[方法]利用Oligo 7软件设计并筛选出115基因特异性扩增引物,以ORFV FJ-ND株基因组为模板,通过PCR技术扩增获得其基因序列,再将115基因克隆至pGEX-6p-1上,重组质粒pGEX-6p-115,并对其进行测序鉴定,鉴定正确后转化RosettaganmiB(DE3)感受态细胞,通过优化IPTG浓度和诱导时间获得重组融合蛋白最佳表达条件,用SDS-PAGE对表达的目的蛋白进行分析.[结果]115基因全长450 bp,编码149个氨基酸;115基因可以在RosettaganmiB中表达,重组蛋白分子大小约42 kDa,主要以包涵体形式表达.[结论]成功克隆了ORFV 115基因,构建了pGEX-6P-115原核表达质粒,优化了重组蛋白表达条件并进行纯化,为进一步探索ORFV 115蛋白在感染宿主过程中的机制和作用奠定基础.
文献关键词:
羊口疮病毒;115基因;克隆;原核表达
作者姓名:
林裕胜;黄丽丽;江锦秀;张靖鹏;刘维巍;刘庆华;胡奇林
作者机构:
福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州 350013;新疆生产建设兵团第十一师第五中学,新疆 乌鲁木齐 830000;福建农林大学动物科学学院,福建 福州 350002
文献出处:
引用格式:
[1]林裕胜;黄丽丽;江锦秀;张靖鹏;刘维巍;刘庆华;胡奇林-.羊口疮病毒115基因的克隆及原核表达)[J].福建农业学报,2022(07):850-854
A类:
RosettaganmiB
B类:
羊口疮病毒,原核表达,ORFV,Oligo,软件设计,因特,扩增引物,FJ,ND,基因序列,基因克隆,pGEX,6p,重组质粒,DE3,感受态,IPTG,诱导时间,融合蛋白,SDS,PAGE,目的蛋白,全长,bp,分子大小,kDa,包涵体,6P,重组蛋白表达,宿主
AB值:
0.373742
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