典型文献
蓝舌病病毒NS4基因原核表达载体的构建与表达
文献摘要：
蓝舌病病毒(Bluetounge virus,BTV)非结构蛋白4(Non-structural protein 4,NS4)拮抗干扰素的产生,在BTV逃避宿主天然免疫的过程中发挥重要作用.利用PCR扩增得到NS4基因,与空载体pET-32a双酶切后连接,构建pET-32a-NS4 原核表达载体;将pET-32a-NS4转化至E.coli BL21感受态细胞,以IPTG诱导表达;利用SDS-PAGE确定IPTG的最佳诱导浓度、时间与重组蛋白的表达形式;利用Western blot分析重组蛋白的表达情况.结果表明,成功构建pET-32a-NS4原核表达载体;IPTG最佳诱导浓度为0.8 mmol/L,时间为6 h,蛋白主要以包涵体形式表达;Western blot在27 ku处可见目的条带,与预期相符.本研究成功构建pET-32a-NS4原核表达载体,实现NS4蛋白的大量、高效表达,为进一步探究NS4蛋白在BTV拮抗宿主天然免疫中的作用机制提供材料.
文献关键词：
蓝舌病病毒;NS4基因;载体构建;原核表达
中图分类号：
作者姓名：
马骥;朱文青;林俊泓;易华山;胡庭俊
作者机构：
广西大学动物科学技术学院,南宁 530005;西南大学动物医学院,重庆荣昌 402460
文献出处：
引用格式：
[1]马骥;朱文青;林俊泓;易华山;胡庭俊-.蓝舌病病毒NS4基因原核表达载体的构建与表达)[J].西北农业学报,2022(09):1168-1173
A类：
Bluetounge
B类：
蓝舌病病毒,NS4,原核表达载体,virus,BTV,非结构蛋白,Non,structural,protein,干扰素,逃避,宿主,天然免疫,空载,pET,32a,双酶,coli,BL21,感受态,IPTG,诱导表达,SDS,PAGE,重组蛋白,表达形式,blot,包涵体,ku,条带,高效表达,载体构建
AB值：
0.272486
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