典型文献
羔羊睾丸细胞酵母双杂交cDNA文库构建及鉴定
文献摘要：
为筛选与羊口疮病毒(OrfV)蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,构建了羔羊睾丸(LT)细胞酵母双杂交cDNA文库.采用Trizol法提取LT细胞总RNA,运用SMART技术经LD-PCR合成全长cDNA,再经同源重组法将pGADT7-Rec载体与cDNA共转化至Y187酵母菌株,利用营养缺陷型选择性培养基(SD/-Leu)筛选阳性克隆,并鉴定文库质量.结果显示:LT细胞酵母双杂交cDNA文库构建成功,其文库滴度为2.33×108 CFU·mL-1,文库容量达3.5×109 CFU;随机挑选34个单克隆进行PCR检测,插入片段大小为250～2000 bp,平均大小约为1000 bp,文库重组率达100％.由此表明,本文库达到高质量文库条件,可作为研究OrfV与宿主细胞间互作机制的生物材料.
文献关键词：
羔羊睾丸细胞;酵母双杂交;cDNA文库;羊口疮病毒
中图分类号：
作者姓名：
杨倩;包涛涛;鲜思美;张友;梁倩;顾庆林
作者机构：
贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳550025;贵州省黔东南州农业农村局,贵州 黔东南556000;贵州省动物疫病研究室,贵州 贵阳550025
文献出处：
引用格式：
[1]杨倩;包涛涛;鲜思美;张友;梁倩;顾庆林-.羔羊睾丸细胞酵母双杂交cDNA文库构建及鉴定)[J].福建农林大学学报（自然科学版）,2022(02):238-242
A类：
羔羊睾丸细胞,OrfV
B类：
酵母双杂交,cDNA,文库构建,羊口疮病毒,蛋白相互作用,宿主,主细胞,LT,Trizol,SMART,LD,全长,再经,同源重组,pGADT7,Rec,共转化,Y187,酵母菌株,选择性培养基,Leu,滴度,CFU,库容量,单克隆,bp,库达,互作机制,生物材料
AB值：
0.297298
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