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典型文献
芍药ACS基因的克隆及其蛋白质原核表达
文献摘要:
为了研究芍药ACS基因的功能,应用RACE技术从芍药切花品种桃花飞雪中克隆了PlACS基因cDNA序列,利用生物信息学方法对其编码的蛋白质进行了综合分析;以pET32a为骨架,构建了 PlACS基因的原核表达载体,建立了 P1ACS蛋白高效的原核表达体系.结果表明,PlACS cDNA全长1 752 bp(GenBank登录号JX512359),共编码492个氨基酸,具有7个保守结构域及活性位点K278;分子进化分析表明,PlACS和牡丹ACS亲缘关系最近;二级结构预测发现,PlACS蛋白由α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲组成,四者比例分别为40.04%,16.26%,6.91%和36.79%;同源建模显示,PlACS蛋白以同源二聚体形式存在.PlACS蛋白最佳诱导表达条件为基因工程菌菌体密度A600达0.2时,在菌液中加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,在37℃诱导2 h.PlACS重组蛋白高效原核表达体系为后续通过变复性获得有生物学活性的PlACS蛋白及其酶学功能鉴定奠定基础.
文献关键词:
芍药;PlACS;基因克隆;序列分析;原核表达
作者姓名:
肖士奎;李芳;张文婷;吕淑芳;史国安;吴疆;范丙友
作者机构:
河南科技大学农学院,河南洛阳 471023;中机十院国际工程有限公司,河南洛阳 471003;榆林学院信息工程学院,陕西榆林 719000
文献出处:
引用格式:
[1]肖士奎;李芳;张文婷;吕淑芳;史国安;吴疆;范丙友-.芍药ACS基因的克隆及其蛋白质原核表达)[J].华北农学报,2022(05):36-44
A类:
PlACS,P1ACS,JX512359,K278,酶学功能
B类:
芍药,RACE,切花品种,桃花,飞雪,cDNA,利用生物,生物信息学方法,pET32a,原核表达载体,表达体系,全长,bp,GenBank,登录号,保守结构域,活性位点,分子进化,进化分析,牡丹,亲缘关系,二级结构,结构预测,折叠,无规则,卷曲,同源建模,同源二聚体,诱导表达,基因工程菌,菌体密度,A600,菌液,IPTG,重组蛋白,得有,生物学活性,白及,功能鉴定,基因克隆,序列分析
AB值:
0.344291
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