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猪肺炎支原体Mhp367蛋白不同区段与恢复期血清反应能力的比较
文献摘要：
[背景]课题组前期研究发现猪肺炎支原体Mhp367蛋白是体液免疫显性蛋白,但该蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力尚不明确.[目的]鉴定Mhp367蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力.[方法]利用不同的引物组合扩增mhp367基因片段,扩增的片段连接pGEX-6P-1、pGEX-4T-3或pGEX-5X-3载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞.提取的质粒经BamH I和Xho I双酶切及测序确定重组质粒是否构建成功.正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞构建重组菌.重组菌经IPTG诱导和超声破菌后,经与谷胱甘肽beads结合和SDS-PAGE电泳检测目的蛋白表达情况.表达目的蛋白的重组菌破菌后上清包被谷胱甘肽板,ELISA方法鉴定Mhp367蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力.[结果]构建了 9个能以可溶形式表达目的蛋白的重组菌;9个Mhp367蛋白片段均为体液免疫显性,第394-524位氨基酸区段与猪肺炎支原体恢复期血清反应最强,是一个良好的疫苗候选抗原区段.[结论]本研究为猪肺炎支原体基因工程亚单位疫苗的研发提供了候选抗原靶标.
文献关键词：
猪肺炎支原体;Mhp367;恢复期血清;ELISA
中图分类号：
作者姓名：
杨梅;董青霜;冯林;黄佐兴;吴彦;丁红雷
作者机构：
西南大学动物医学院动物支原体学实验室,重庆400715;新疆生产建设兵团第十师畜牧兽医工作站,新疆北屯836099
文献出处：
引用格式：
[1]杨梅;董青霜;冯林;黄佐兴;吴彦;丁红雷-.猪肺炎支原体Mhp367蛋白不同区段与恢复期血清反应能力的比较)[J].微生物学通报,2022(06):2152-2159
A类：
Mhp367,mhp367
B类：
猪肺炎支原体,区段,恢复期血清,反应能力,前期研究,体液免疫,引物,pGEX,6P,4T,5X,大肠杆菌,DH5,感受态,粒经,BamH,Xho,双酶,重组质粒,BL21,DE3,IPTG,谷胱甘肽,beads,SDS,PAGE,电泳,检测目的,目的蛋白,上清,包被,候选抗原,基因工程,亚单位疫苗,靶标
AB值：
0.233755
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