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典型文献
新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定
文献摘要:
旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原.该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白,经Ni2+柱亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况.结果表明,已成功表达含His标签的S1蛋白,并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白.此外,蛋白刺激细胞的结果表明,原核表达的S1蛋白免疫原性良好,能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子,促进RAW264.7细胞产生免疫反应.综上,该研究成功构建了 pColdI-S1重组质粒,获得了 SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白.
文献关键词:
SARS-CoV-2;S1蛋白;原核表达;生物活性鉴定
作者姓名:
汪巧菊;胡雨萌;温亚亚;宋丽;孟闯;潘志明;焦新安
作者机构:
扬州大学/江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心/农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室/教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,扬州225009
文献出处:
引用格式:
[1]汪巧菊;胡雨萌;温亚亚;宋丽;孟闯;潘志明;焦新安-.新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定)[J].生物技术通报,2022(03):157-163
A类:
2S1
B类:
免疫活性,SARS,CoV,免疫预防,候选抗原,研究利用,刺突蛋白,Spike,亚基,基序,同源重组,冷休克,表达载体,大肠杆菌,BL21,感受态,诱导表达,Ni2+,亲和层析,层析纯化,SDS,PAGE,blotting,目的蛋白,His,多克隆抗体,抗体反应,白刺,原核表达,免疫原性,小鼠巨噬细胞,趋化因子,RAW264,免疫反应,pColdI,重组质粒,生物活性鉴定
AB值:
0.405254
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