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典型文献
茉莉花JsMYB305转录因子的原核表达及蛋白纯化
文献摘要:
[目的]获得茉莉花香气调控转录因子JsMYB305的重组蛋白,为深入研究JsMYB305调控茉莉萜类香气代谢的分子机理及筛选其他互作蛋白提供基础.[方法]通过酶切连接的方式,将JsMYB305的编码序列构建到原核表达载体pGEX-4T-1,转化BL21(DE3)表达菌株,通过IPTG诱导蛋白表达、GST亲和树脂分离纯化,最后Western Blot鉴定重组蛋白.[结果]重组蛋白的诱导条件为0.2 mmol·L?1 IPTG,最适宜纯化的温度和时间为28℃诱导4 h,经20 mmol·L?1 GSH洗脱的蛋白纯度较好,Western Blot结果表明重组蛋白的大小正确.[结论]成功获得了JsMYB305重组蛋白,为后期利用GST-pull down技术筛选互作蛋白及EMSA研究JsMYB305对特定启动子位点的结合提供基础.
文献关键词:
茉莉花;MYB转录因子;原核表达;蛋白纯化
作者姓名:
万超;张月;胡莉;伍炳华;袁媛
作者机构:
福建农林大学园艺学院,福建 福州 350002
文献出处:
引用格式:
[1]万超;张月;胡莉;伍炳华;袁媛-.茉莉花JsMYB305转录因子的原核表达及蛋白纯化)[J].福建农业学报,2022(02):164-169
A类:
JsMYB305
B类:
茉莉花,蛋白纯化,花香,香气,气调,重组蛋白,萜类,分子机理,互作蛋白,编码序列,原核表达载体,pGEX,4T,BL21,DE3,IPTG,GST,树脂分离,分离纯化,Blot,诱导条件,温度和时间,GSH,洗脱,蛋白纯度,pull,down,技术筛选,白及,EMSA,启动子
AB值:
0.340518
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