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布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用
文献摘要：
为了研究和探讨布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白对鼠源树突状细胞(BM-DCs)分化和成熟的影响,用布鲁氏菌S2疫苗株为模板扩增L7/L12基因,构建重组质粒pET30a-L7/L12,用大肠埃希菌原核表达系统进行诱导表达,并用Ni柱对表达的蛋白进行纯化.用IL-4和GM-CSF诱导培养鼠源DCs,用脂多糖(LPS)和L7/L12蛋白刺激DCs后检测其表面共刺激分子和炎症因子的变化.结果表明,重组蛋白在1 mmol·L-1的IPTG、16℃过夜的条件下以可溶性形式高效表达,其大小为18 ku,纯度达到93％以上并有一定的反应原性.流式细胞仪检测被刺激的BM-DCs细胞表面CD40、CD80等抗原分子的表达显著(P<0.05)高于空白对照组.qPCR结果显示,炎性细胞因子TNF-β、IL-1β、IL-12极显著(P<0.01)高于空白对照组.重组L7/L12蛋白具有刺激DCs细胞分化、成熟和促进炎症因子释放的功能.
文献关键词：
布鲁氏菌;树突状细胞;免疫细胞活化
中图分类号：
作者姓名：
张广林;徐龙;高云艳;李玲霞;尚佑军;张勇;曹小安;赵兴绪
作者机构：
甘肃农业大学 动物医学院,甘肃 兰州730070;中国农业科学院 兰州兽医研究所,甘肃 兰州730000
文献出处：
引用格式：
[1]张广林;徐龙;高云艳;李玲霞;尚佑军;张勇;曹小安;赵兴绪-.布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用)[J].浙江农业学报,2022(03):489-497
A类：
B类：
布鲁氏菌,菌核,核糖体,L7,L12,原核表达,树突状细胞,BM,DCs,用布,S2,疫苗株,重组质粒,pET30a,大肠埃希菌,表达系统,诱导表达,GM,CSF,诱导培养,脂多糖,LPS,白刺,共刺激分子,重组蛋白,IPTG,过夜,高效表达,ku,反应原性,流式细胞仪,细胞表面,CD40,CD80,空白对照,qPCR,炎性细胞因子,细胞分化,免疫细胞活化
AB值：
0.375454
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