典型文献
拟南芥AtTERT对大肠杆菌非生物胁迫抗性的影响
文献摘要:
端粒酶是真核生物中维持染色体末端DNA完整性的一类特殊逆转录酶,研究拟南芥AtTERT对大肠杆菌生长及非生物胁迫的影响,为深入研究TERT蛋白非端粒功能奠定基础.将拟南芥AtTERT转入大肠杆菌,成功构建pET32a-AtTERT原核表达载体,优化诱导条件,纯化并鉴定GST-AtTERT融合蛋白,运用Western blotting验证,同时采用点板法检测转AtTERT大肠杆菌的非生物胁迫抗性.结果表明,优化诱导条件为感受态细胞Transetta(DE3)诱导温度20℃、诱导剂(IPTG)浓度为0.5 mmol/L;纯化的GST-AtTERT融合蛋白相对分子量大小为156 kD;Western blotting验证结果显示在诱导全菌、上清及沉淀中均出现并与预期分子量大小结果一致的蛋白条带.转AtTERT重组菌在NaCl(400和500 mmol/L)、甘露醇(400和600 mmol/L)和H2O2(0.4 mmol/L)的LB固体培养基上的存活率显著高于空载对照菌,而利用液氮反复冻融6次时,转AtTERT重组菌存活率显著低于空载对照菌.转AtTERT大肠杆菌NaCl盐胁迫、甘露醇渗透胁迫、过氧化氢氧化胁迫抗性增强,但低温抗性减弱,表明拟南芥AtTERT具有抗非生物胁迫的非端粒功能.
文献关键词:
拟南芥;端粒酶逆转录酶;遗传转化;融合蛋白表达;非生物胁迫
中图分类号:
作者姓名:
杨佳慧;孙玉萍;陆雅宁;刘欢;卢存福;陈玉珍
作者机构:
北京林业大学生物科学与生物技术学院 教育部林木花卉育种与基因工程重点实验室,北京 100083
文献出处:
引用格式:
[1]杨佳慧;孙玉萍;陆雅宁;刘欢;卢存福;陈玉珍-.拟南芥AtTERT对大肠杆菌非生物胁迫抗性的影响)[J].生物技术通报,2022(02):1-9
A类:
AtTERT
B类:
拟南芥,大肠杆菌,非生物胁迫,胁迫抗性,真核生物,转入,pET32a,原核表达载体,诱导条件,GST,blotting,感受态,Transetta,DE3,诱导剂,IPTG,白相,相对分子量,kD,上清,小结,白条,条带,NaCl,甘露醇,H2O2,LB,固体培养基,空载,液氮,反复冻融,菌存活率,盐胁迫,渗透胁迫,过氧化氢氧化,氧化胁迫,低温抗性,抗非,端粒酶逆转录酶,遗传转化,融合蛋白表达
AB值:
0.279769
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