典型文献
青杄PwHAP5基因原核表达及多克隆抗体制备
文献摘要：
制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础.经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5.经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍柱纯化蛋白产物.蛋白经SDS-PAGE检测后再免疫兔子制备兔抗血清.血清经ProteinA纯化后,通过SDS-PAGE和Western blot检测抗体纯度和特异性.结果表明,成功构建了原核表达载体pET-48b-PwHAP5,制备了分子质量约为45 kD的重组蛋白PwHAP5.获得的青杄PwHAP5兔抗血清经间接ELISA法检测效价达1:729000以上;制备的PwHAP5蛋白兔多克隆抗体能特异性识别抗原,效价高,满足后续研究PwHAP5蛋白在青杄生长发育中的功能等需求.
文献关键词：
PwHAP5基因;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
覃雪晶;王雨涵;曹一博;张凌云
作者机构：
北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室,北京 100083
文献出处：
引用格式：
[1]覃雪晶;王雨涵;曹一博;张凌云-.青杄PwHAP5基因原核表达及多克隆抗体制备)[J].生物技术通报,2022(08):142-149
A类：
PwHAP5,48b,ProteinA
B类：
青杄,多克隆抗体制备,Picea,wilsonii,基因功能,花粉,pET,原核表达载体,重组蛋白,His,NTA,SDS,PAGE,兔子,兔抗血清,blot,检测抗体,分子质量,kD,效价,白兔,特异性识别,价高,蛋白纯化
AB值：
0.206421
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