典型文献
榨菜BjuFIP蛋白纯化及非生物胁迫下基因表达模式分析
文献摘要:
采用荧光定量PCR技术分析BjuFIP在不同非生物逆境胁迫下的表达模式.通过无缝克隆技术将BjuFIP的CDS序列构建到原核表达载体pGEX4T-1上,测序正确后转化大肠杆菌表达菌株BL21,对BjuFIP-GST蛋白进行体外诱导表达纯化.结果表明,BjuFIP-1显著受低温(4℃)、高温(37℃)和NaCl的诱导表达,BjuFIP-2显著受低温(4℃)、高温(37℃)、ABA、NaCl以及Mannitol的诱导表达,说明BjuFIP在调控榨菜响应非生物逆境胁迫过程中具有重要作用.SDS-PAGE电泳检测结果显示,在16、25和37℃以及1 mmol·L-1 IPTG诱导条件下,重组菌株均能够表达出分子质量约为55 ku的BjuFIP-GST融合蛋白,并且16℃诱导条件下,BjuFIP-GST蛋白较多以可溶性蛋白的形式存在,通过Glutathione Beads亲和层析柱纯化后,获得了大量纯度较好的BjuFIP-GST融合蛋白.BjuFIP显著受非生物逆境胁迫的诱导表达,在调控榨菜响应非生物逆境胁迫过程中具有重要作用,并且获得了大量纯度较高的BjuFIP-1-GST和BjuFIP-2-GST融合蛋白,为后期进一步探究BjuFIP在调控榨菜抗逆过程中的功能提供依据.
文献关键词:
榨菜;F-box蛋白;BjuFIP;基因表达;蛋白纯化
中图分类号:
作者姓名:
颜论;陈国建;陈明飞;游经番;彭姣姣;程春红
作者机构:
长江师范学院生命科学与技术学院,重庆408100
文献出处:
引用格式:
[1]颜论;陈国建;陈明飞;游经番;彭姣姣;程春红-.榨菜BjuFIP蛋白纯化及非生物胁迫下基因表达模式分析)[J].福建农林大学学报(自然科学版),2022(05):606-612
A类:
BjuFIP
B类:
榨菜,蛋白纯化,非生物胁迫,基因表达模式,表达模式分析,非生物逆境胁迫,无缝克隆技术,CDS,原核表达载体,pGEX4T,大肠杆菌表达,BL21,GST,体外诱导,诱导表达,表达纯化,NaCl,ABA,Mannitol,SDS,PAGE,电泳,IPTG,诱导条件,重组菌株,分子质量,ku,融合蛋白,可溶性蛋白,Glutathione,Beads,亲和层析,层析柱,抗逆,box
AB值:
0.259415
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