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典型文献
番茄SlMYB86基因的原核表达及缺氮胁迫下的表达分析
文献摘要:
MYB转录因子参与植物细胞形态与模式建成、次级代谢的调控以及生物和非生物胁迫应答等反应.该研究采用RT PCR方法扩增了番茄SlMYB86基因,并进行了聚类分析和保守域序列分析,构建原核表达载体和诱导纯化蛋白,利用qRT PCR和Western blot检测SlMYB 86在缺氮复氮下的表达水平,为深入探究番茄MYB86转录因子在缺氮胁迫下的功能奠定基础.结果 表明:(1)番茄SlMYB86与番茄SlMYB26在进化树上属于同一分支,亲缘关系较近,且SlMYB86含有2个Myb DNA-binding保守结构域,属于R2R3 MYB型转录因子.(2)qRT PCR分析发现,SlMYB86基因在番茄根和叶中均有表达,缺氮胁迫下SlMYB 86表达较对照显著增加.(3)成功构建pET 28a SlMYB86原核表达载体并转化E.coli BL21 (DE3),SDS-PAGE和Western blot结果表明,SlMYB86蛋白的最佳诱导条件为0.5 mmol/L的IPTG、37℃诱导8h;目的 蛋白相对分子量大约为41 kD,与预期大小一致,并获得较高纯度的SlMYB86原核蛋白.(4)将纯化的SlMYB86蛋白免疫小白鼠获得抗体,利用该抗体进行Western blot分析发现,番茄中SlMYB86蛋白在缺氮胁迫后表达上调,表明番茄SlMYB86基因参与了缺氮胁迫的应答.
文献关键词:
番茄;MYB86转录因子;基因克隆;原核表达;Western blot
作者姓名:
翟佳丽;坝玉蓉;甘雪;徐慧妮
作者机构:
昆明理工大学生命科学与技术学院,昆明650224
文献出处:
引用格式:
[1]翟佳丽;坝玉蓉;甘雪;徐慧妮-.番茄SlMYB86基因的原核表达及缺氮胁迫下的表达分析)[J].西北植物学报,2022(01):13-20
A类:
SlMYB86,SlMYB,MYB86,SlMYB26
B类:
番茄,缺氮胁迫,表达分析,植物细胞,细胞形态,次级代谢,非生物胁迫,胁迫应答,序列分析,原核表达载体,qRT,blot,复氮,进化树,树上,亲缘关系,Myb,binding,保守结构域,R2R3,pET,28a,coli,BL21,DE3,SDS,PAGE,诱导条件,IPTG,8h,白相,相对分子量,kD,高纯度,核蛋白,小白鼠,基因克隆
AB值:
0.244954
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