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典型文献
小反刍兽疫病毒非结构蛋白C和V基因突变的克隆与表达
文献摘要:
反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)C和V蛋白是P基因通过特殊编码方式产生的两种非结构蛋白,他们通过抑制干扰素产生在天然免疫中发挥重要作用.本研究将C基因起始密码子AUG突变为ACG,并在氨基酸序列的第9位、第12位引入终止密码子,在V基因编码氨基酸序列的第7位、第285位、第294位引入三个终止密码子,运用PCR技术扩增获得了表达沉默的突变基因△C和△V,构建了真核表达载体p3flag-CMV-14-△C和p3flag-CMV-14-△V.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测表明转染突变基因质粒HEK-293T细胞中C基因(P<0.001)和V基因(P<0.01)表达均极显著降低,蛋白质印迹(Western blot)检测表明转染突变基因质粒细胞中C蛋白和V蛋白均无表达.研究结果为进一步研究PPRV病毒C和V蛋白的功能提供了科学依据.
文献关键词:
反刍兽疫病毒;基因突变;真核表达;蛋白质印迹;实时荧光定量PCR
作者姓名:
和伟程;石晓玲;李菊;张潇文;刘方程;李琼毅;柏家林
作者机构:
西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030;西北民族大学生命科学与工程学院;甘肃省医学科学研究院
文献出处:
引用格式:
[1]和伟程;石晓玲;李菊;张潇文;刘方程;李琼毅;柏家林-.小反刍兽疫病毒非结构蛋白C和V基因突变的克隆与表达)[J].畜牧兽医杂志,2022(03):10-15
A类:
peste,petits,p3flag
B类:
小反刍兽疫病毒,非结构蛋白,基因突变,克隆与表达,des,ruminants,virus,PPRV,编码方式,制干,干扰素,天然免疫,AUG,ACG,氨基酸序列,终止密码子,基因编码,突变基因,真核表达载体,CMV,qPCR,转染,质粒,HEK,293T,蛋白质印迹,blot
AB值:
0.283466
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