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猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
文献摘要：
为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体,将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合,密码子按大肠杆菌偏嗜性优化,构建了大肠杆菌表达质粒,制备获得重组M蛋白.取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白,将脾脏淋巴细胞和SP2/0细胞融合,用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,获得4株分泌M蛋白抗体的杂交瘤细胞株.其中1E7、2F7、3A12的细胞上清液抗体效价为1 ∶ 3 200,3G7的细胞上清液抗体效价为1:800,传至第15代均能稳定分泌抗体.单抗经亚型鉴定可知1E7、2F7、3A12的重链类型为Ig2a,3G7的重链类型为IgG1,轻链类型都为κ型.经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定,4株单克隆抗体均可与PRRSV产生特异性反应,鉴定出2个抗原表位,为PRRSV诊断和疫苗研制奠定了基础.
文献关键词：
猪繁殖与呼吸综合征病毒;M蛋白;单克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
王梦婕;张杰;孙杨杨;白娟;刘星;姜平
作者机构：
南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室,江苏南京 210095
文献出处：
引用格式：
[1]王梦婕;张杰;孙杨杨;白娟;刘星;姜平-.猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定)[J].畜牧与兽医,2022(06):91-96
A类：
FJ1402,1E7,2F7,3A12,3G7,Ig2a
B类：
猪繁殖与呼吸综合征病毒,单克隆抗体,抗体制备,抗原表位鉴定,PRRSV,NADC30,毒株,胞外区,TAT,穿膜肽,肽基,基因融合,密码子,大肠杆菌表达,质粒,周龄,雌性,BALB,重组蛋白,脾脏淋巴细胞,SP2,细胞融合,杂交瘤细胞株,上清液,抗体效价,单抗,IgG1,轻链,间接免疫荧光试验,IFA,blot,疫苗研制
AB值：
0.252782
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