典型文献
牛病毒性腹泻病毒多表位基因疫苗的构建及其免疫效果评价
文献摘要：
旨在构建牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)多表位基因与BVDV结构蛋白E0、E2基因的表达载体并检测其免疫效果.从NCBI上获得BVDV的4种具有免疫原性的结构蛋白C、E0、E2、NS3基因序列,利用生物学方法预测其B、T细胞表位;将获得的序列进行连接,重组获得新肽段(命名为AKK),通过生物学在线软件分析AKK序列的二级结构、亲水性、抗原性、三级结构;PCR分别扩增上述基因序列,构建重组表达载体GV658-AKK-E0-E2、GV658-AKK、GV658-E0、GV658-E2,并将上述构建成功的无内毒素重组质粒转染至MDBK细胞,通过蛋白免疫印迹.经PCR扩增获得2 910、1 170、951和729 bp大小的目的条带,与预计相符;经蛋白免疫印迹验证,在34和68 kDa处有AKK蛋白及E0-E2蛋白的融合表达;经流式细胞术验证显示,在CD3+、CD4+细胞占比上,共表达组极显著高于PBS组,显著高于E0组,与ELISA检测IgG抗体水平结果一致.研究表明,试验成功设计了 BVDV多表位序列AKK,并成功构建真核表达载体,AKK、E0、E2蛋白高效表达,共表达组能更好地刺激机体的体液免疫和细胞免疫应答.
文献关键词：
BVDV;表位预测;E0基因;E2基因
中图分类号：
作者姓名：
赵微;张东超;陈婷;何敬文;扈立伟;任君;卢宝平;刘青;包利霞;顾天越;金天明
作者机构：
大津农学院动物科学与动物医学学院,天津 300384;天津市农业科学院,天津 300192
文献出处：
引用格式：
[1]赵微;张东超;陈婷;何敬文;扈立伟;任君;卢宝平;刘青;包利霞;顾天越;金天明-.牛病毒性腹泻病毒多表位基因疫苗的构建及其免疫效果评价)[J].畜牧与兽医,2022(10):102-110
A类：
表位基因,GV658
B类：
牛病毒性腹泻病毒,基因疫苗,免疫效果评价,bovine,viral,diarrhea,virus,BVDV,结构蛋白,E0,E2,NCBI,免疫原性,NS3,基因序列,利用生物,细胞表位,AKK,二级结构,亲水性,抗原性,三级结构,增上,重组表达,内毒素,重组质粒,质粒转染,MDBK,蛋白免疫印迹,bp,条带,kDa,白及,融合表达,流式细胞术,CD3+,CD4+,共表达,PBS,IgG,抗体水平,真核表达载体,高效表达,体液免疫,细胞免疫应答,表位预测
AB值：
0.296084
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