典型文献
弓形虫棒状蛋白ROP54编码基因的生物信息学分析及原核表达
文献摘要：
为了能够获得刚地弓形虫RH株棒状蛋白ROP54的重组蛋白,本研究进行了弓形虫RH株ROP54蛋白编码基因的生物信息分析及原核表达.运用RT-PCR方法扩增刚地弓形虫RH株ROP54蛋白编码基因序列,并连接至pMD-18-T载体,构建出克隆质粒pMD-ROP54后,转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,测序后对基因序列进行生物信息分析.将pMD-ROP54及pET-28a经双酶切及连接,构建出原核表达质粒pET-ROP54,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白表达情况,Western blot鉴定重组蛋白的反应原性.结果显示,成功扩增出长度约1 440 bp的ROP54蛋白编码基因序列.生物信息学分析显示,测序结果与刚地弓形虫M49株比对同源性为99％.预测ROP54蛋白氨基酸序列1至26个氨基酸为信号肽,亲/疏水性最小值是-2.978,最大值是2.700.成功构建了原核表达质粒pET-ROP54,IPTG诱导后经,SDS-PAGE结果可见约52.94kDa大小的蛋白表达,且能够被犬抗弓形虫血清识别,具有良好的反应原性.本研究成功获得了重组蛋白ROP54,为ROP54特性及生物学功能研究奠定基础.
文献关键词：
刚地弓形虫;棒状蛋白ROP54;生物信息学;原核表达
中图分类号：
作者姓名：
丁鹤;宫鹏涛;苑淑贤;郭衍冰;孙兴忠;董航;姚新华;曹利利
作者机构：
吉林省畜牧兽医科学研究院,吉林长春 130062;吉林大学动物医学学院,吉林长春 130062
文献出处：
引用格式：
[1]丁鹤;宫鹏涛;苑淑贤;郭衍冰;孙兴忠;董航;姚新华;曹利利-.弓形虫棒状蛋白ROP54编码基因的生物信息学分析及原核表达)[J].畜牧与兽医,2022(04):102-106
A类：
ROP54,M49,94kDa
B类：
棒状,编码基因,生物信息学分析,原核表达,刚地弓形虫,RH,蛋白编码,生物信息分析,基因序列,pMD,质粒,化入,大肠杆菌,DH5,感受态,pET,28a,双酶,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,SDS,PAGE,重组蛋白表达,blot,反应原性,bp,同源性,氨基酸序列,信号肽,疏水性,最小值,生物学功能,功能研究
AB值：
0.208983
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