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沙门氏菌噬菌体SM-p2内溶酶及穿孔素的生物信息学分析和克隆表达
文献摘要：
沙门氏菌是常见的危害公共安全的食源性致病菌.内溶酶和穿孔素作为新型生物抑菌剂,是噬菌体编码的具有细菌裂解作用的功能蛋白.本文利用十聚寡核苷酸引物和PCR技术对噬菌体SM-p2的DNA进行随机扩增并确定穿孔素基因Hol 2和内溶酶基因Lys 2;使用生物学信息软件分析预测Lys 2和Hol 2的特性;利用大肠杆菌原核表达系统对Lys 2和Hol 2进行克隆表达.结果表明:噬菌体SM-p2是一种具有"穿孔素-内溶酶"裂解体系的双链DNA烈性噬菌体.经生物信息学分析发现,Hol 2是一种仅有一个跨膜结构的Ⅲ型穿孔素,Lys 2是一种没有跨膜结构肽聚糖水解酶.利用大肠杆菌表达系统成功表达了Lys 2和Hol 2,然而,穿孔素能直接裂解细菌细胞内膜,对感受态表达细胞产生毒害作用,导致Hol 2表达量较少.最终获得质量浓度为5.419 mg/mL的内溶酶Lys 2和2.191 mg/mL的穿孔素Hol 2.本研究成功表达了沙门氏菌噬菌体SM-p2的内溶酶和穿孔素,为SM-p2的抑菌研究奠定了分子基础.
文献关键词：
噬菌体;基因克隆;内溶酶;穿孔素
中图分类号：
作者姓名：
戚斌;解天慧;石慧
作者机构：
西南大学食品科学学院 重庆 400715
文献出处：
引用格式：
[1]戚斌;解天慧;石慧-.沙门氏菌噬菌体SM-p2内溶酶及穿孔素的生物信息学分析和克隆表达)[J].中国食品学报,2022(08):32-39
A类：
Hol,肽聚糖水解酶
B类：
沙门氏菌,SM,p2,内溶酶,穿孔素,生物信息学分析,克隆表达,危害公共安全,食源性致病菌,生物抑菌剂,解作,功能蛋白,寡核苷酸,引物,酶基因,Lys,信息软件,分析预测,原核表达,表达系统,解体,双链,烈性噬菌体,膜结构,大肠杆菌表达,内膜,感受态,毒害作用,分子基础,基因克隆
AB值：
0.215456
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