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布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析
文献摘要：
本试验旨在运用分子生物学与生物信息学方法对布鲁氏菌DnaJ蛋白进行分析;将该蛋白进行原核表达,并检验纯化蛋白在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应的能力.以布鲁氏菌M5-90为模板成功扩增目的基因DnaJ,构建重组表达载体pET-30a-DnaJ;利用SDS-PAGE检测DnaJ重组蛋白在大肠杆菌中的表达,并对其进行纯化;用DnaJ蛋白刺激RAW 264.7细胞和小鼠脾细胞,并用DnaJ蛋白免疫小鼠;利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-4及小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体水平的变化.结果显示,DnaJ蛋白二级结构以无规则卷曲结构为主,该蛋白有11个抗原决定簇;SDS-PAGE结果显示,重组菌在37.7 kDa大小的位置有特异表达条带,获得了DnaJ纯化蛋白;DnaJ蛋白可诱导宿主细胞和小鼠产生高水平IFN-γ、IL-4、IgG1和IgG2a抗体.鉴于DnaJ蛋白可在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应,有望成为布鲁氏菌病的候选亚单位疫苗.
文献关键词：
布鲁氏菌;DnaJ蛋白;原核表达;免疫反应
中图分类号：
作者姓名：
印双红;张俊波;李寅翠;张孟琴;毛宏;易萌;蔡春连;张红;李志强;陈创夫
作者机构：
铜仁学院大健康学院,贵州铜仁554300 ;铜仁学院农林工程与规划学院,贵州铜仁554300;铜仁学院贵州省梵净山地区生物多样性保护与利用重点实验室,贵州铜仁554300;铜仁学院材料与化学工程学院,贵州铜仁554300 ;商丘师范学院生物与食品学院,河南商丘476000 ;石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000
文献出处：
引用格式：
[1]印双红;张俊波;李寅翠;张孟琴;毛宏;易萌;蔡春连;张红;李志强;陈创夫-.布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析)[J].中国兽医杂志,2022(01):10-15,26
A类：
B类：
DnaJ,功能分析,分子生物学,生物信息学方法,原核表达,Th1,Th2,免疫反应,M5,目的基因,重组表达,表达载体,pET,30a,SDS,PAGE,重组蛋白,大肠杆菌,白刺,RAW,脾细胞,试剂盒,IFN,小鼠血清,IgG1,IgG2a,抗体水平,蛋白二级结构,无规则,卷曲结构,抗原决定簇,kDa,特异表达,条带,宿主,主细胞,布鲁氏菌病,亚单位疫苗
AB值：
0.355376
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