典型文献
鸭疫里默氏菌DnaK、OmpA和OmpA-DnaK蛋白的免疫原性
文献摘要:
[背景]鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)可引起鸭等多种禽类败血症和浆膜炎,给禽养殖业造成严重经济损失.蛋白疫苗是预防RA感染的重要策略之一.目前,有关RA重组蛋白免疫原性报道较少,且其应用也受到单一蛋白抗原诱导的特异性免疫反应不足的限制.[目的]探究分子伴侣DnaK、外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)和OmpA-DnaK蛋白疫苗在鸭体内诱导的免疫应答,评估其免疫原性,为RA疫苗抗原研发提供依据.[方法]克隆DnaK和OmpA基因并分别与pET-32a(+)载体相连,利用限制性酶切位点NcoI和BamH I将OmpA连接至DnaK基因上游,经原核表达和纯化制得重组蛋白DnaK、OmpA和OmpA-DnaK.3种重组蛋白分别皮下免疫雏鸭2次,检测其血清抗体滴度、淋巴细胞增殖和细胞因子(IL-2和IL-4)水平;以RA-GH5肌肉注射攻毒,检查其组织病理学变化及免疫保护率.[结果]成功表达了 DnaK、OmpA和OmpA-DnaK重组蛋白,分子量分别约为90、60和130 kDa.3种蛋白疫苗均能诱导宿主产生体液和细胞免疫应答,并且诱导的免疫保护反应减轻了 RA引起的组织病理学损伤.与单独DnaK或OmpA免疫相比,OmpA-DnaK显著提高了血清抗体滴度、淋巴细胞增殖指数,以及IL-2和IL-4细胞因子水平.OmpA-DnaK对鸭的免疫保护率为50%,DnaK和OmpA均为30%.[结论]RA重组OmpA、DnaK和OmpA-DnaK蛋白疫苗均能诱导鸭免疫反应,并且DnaK与OmpA融合表达可引起更强的体液免疫和细胞免疫应答.
文献关键词:
鸭疫里默氏菌;分子伴侣DnaK;外膜蛋白A;融合表达;免疫原性
中图分类号:
作者姓名:
钟璐嘉;蒋文灿;蒋鑫;霞雨;曾晓慧;李鑫
作者机构:
四川农业大学动物医学院,四川成都611130;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川成都611130
文献出处:
引用格式:
[1]钟璐嘉;蒋文灿;蒋鑫;霞雨;曾晓慧;李鑫-.鸭疫里默氏菌DnaK、OmpA和OmpA-DnaK蛋白的免疫原性)[J].微生物学通报,2022(05):1705-1718
A类:
DnaK,NcoI
B类:
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AB值:
0.238035
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