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猪源T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白-1(TIM-1)多克隆抗体制备与鉴定
文献摘要：
为了探究猪源T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白-1(sTIM-1)的生物学功能,制备sTIM-1多克隆抗体,通过软件分析sTIM-1蛋白抗原表位及亲水性,并设计引物,以sTIM-1基因为模板扩增sTIM-1黏蛋白功能域编码基因(sTIM-1-M),成功构建了重组表达质粒pET28a-sTIM-1-M,并在大肠杆菌Rosetta 2中诱导表达.以纯化的重组蛋白sTIM-1-M与佐剂混合免疫新西兰大白兔制备多抗血清.SDS-PAGE及Western blot证实了该重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达,分子量约为36kDa.经Western blot与免疫荧光试验(IFA)验证sTIM-1多抗血清可特异性识别293T细胞表达的sTIM-1.免疫沉淀(IP)结果显示制备的多抗血清可与sTIM-1蛋白互作.以上数据表明本研究制备的sTIM-1多克隆抗体具有良好的反应性和特异性.sTIM-1多克隆抗体的制备为进一步研究sTIM-1参与病毒入侵细胞的机制奠定了基础.
文献关键词：
猪源TIM-1;黏蛋白功能域;原核表达;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
焦文龙;杨兴淼;梁真洁;潘俊慧;曹瑞兵
作者机构：
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
文献出处：
引用格式：
[1]焦文龙;杨兴淼;梁真洁;潘俊慧;曹瑞兵-.猪源T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白-1(TIM-1)多克隆抗体制备与鉴定)[J].畜牧与兽医,2022(10):116-121
A类：
sTIM,黏蛋白功能域,36kDa
B类：
猪源,细胞免疫,免疫球蛋白,多克隆抗体制备,生物学功能,抗原表位,亲水性,引物,编码基因,重组表达,质粒,pET28a,大肠杆菌,Rosetta,诱导表达,重组蛋白,佐剂,混合免疫,新西兰大白兔,多抗,抗血清,SDS,PAGE,blot,分子量,免疫荧光试验,IFA,特异性识别,293T,免疫沉淀,蛋白互作,上数,反应性,病毒入侵,原核表达
AB值：
0.229189
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