典型文献
布鲁氏菌Ⅵ型分泌系统VIRB5诱导机体免疫反应的研究
文献摘要：
为分析布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统VIRB5诱导机体产生的免疫反应,本研究根据布鲁氏菌S2308virB5基因序列(BAB2-0064)设计引物,PCR扩增virB5基因并测序无误后构建表达载体pET-32a-virb5,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达后,采用亲和层析镍柱纯化目的蛋白,并利用SDS-PAGE及western blot鉴定;分别将表达的重组VIRB5蛋白(rVIRB5)(50 μg/只/次,共3次)和布鲁氏菌弱毒苗(RB51,1×106cfu/只)免疫小鼠,分别在免疫后不同时间采血,采用ELISA试剂盒分别检测小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5及IgG抗体水平.PCR及测序结果显示,扩增的virB5基因为717 bp,编码239个氨基酸.SDS-PAGE结果显示,rVIRB5以可溶性形式表达,分子量为43.6ku,且纯化效果较好.Western blot结果显示,rVIRB5可以与布鲁氏菌阳性血清反应,在43.6 ku出现特异性条带,反应原性较好.ELISA结果显示,rVIRB5免疫小鼠后产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5及IgG抗体水平均随免疫时间的延长而显著升高(P＜0.05、P＜0.01),且均在免疫后35 d达到峰值,与RB51免疫组小鼠产生的免疫水平基本相当,且均显著高于PBS组.上述结果表明,经大肠杆菌表达的布鲁氏菌rVIRB5可诱导小鼠产生较强的细胞免疫和体液免疫反应,本研究为布鲁氏菌病亚单位疫苗的开发提供参考依据.
文献关键词：
布鲁氏菌;IV型分泌系统;VIRB5;免疫反应
中图分类号：
作者姓名：
魏淑娟;武浩仪;李梦含;廖增广;高萌萌;王倩;李志强;王书利
作者机构：
河南师范大学生命科学学院,河南 新乡 453007;商丘师范学院生物与食品学院,河南 商丘 476000
文献出处：
引用格式：
[1]魏淑娟;武浩仪;李梦含;廖增广;高萌萌;王倩;李志强;王书利-.布鲁氏菌Ⅵ型分泌系统VIRB5诱导机体免疫反应的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(07):782-786
A类：
VIRB5,S2308virB5,BAB2,virB5,virb5,rVIRB5,RB51,6ku
B类：
分泌系统,机体免疫,免疫反应,究根,基因序列,引物,无误,建表,表达载体,pET,32a,BL21,DE3,IPTG,目的蛋白,亲和层析,SDS,PAGE,western,blot,106cfu,采血,试剂盒,小鼠血清,IFN,IgG,抗体水平,bp,分子量,阳性血清,条带,反应原性,免疫水平,PBS,大肠杆菌表达,细胞免疫,体液免疫,布鲁氏菌病,亚单位疫苗,IV
AB值：
0.279247
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