典型文献
PK-15细胞ANXA8膜联蛋白原核表达及多克隆抗体制备
文献摘要：
为了制备ANXA8膜联蛋白的多克隆抗体,本研究以PK-15细胞ANXA8基因为模板,通过RT-PCR扩增得到猪源ANXA8基因,并克隆到pGEX6p1载体.加入His-tag标签,成功构建了重组质粒pGEX6p1-ANXA8,鉴定正确后将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,纯化后的重组蛋白利用SDS-PAGE、Western blot进行鉴定.以纯化后的重组蛋白作为抗原,免疫SPF级昆明鼠,获得针对ANXA8蛋白的多克隆抗体.经过ELISA检测,抗体效价达1 ∶25 600,经过Western blot和间接免疫荧光(IFA)检测,抗体可以与ANXA8蛋白产生特异性结合反应.本试验成功地应用大肠杆菌表达ANXA8蛋白,表达的蛋白具有免疫原性,并获得鼠源阳性血清,为ANXA8蛋白结构及功能的研究奠定基础.
文献关键词：
ANXA8蛋白;表达;多抗
中图分类号：
作者姓名：
李丹阳;吴青萍;方庆励;莫筱可;黄伟坚
作者机构：
广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530004
文献出处：
引用格式：
[1]李丹阳;吴青萍;方庆励;莫筱可;黄伟坚-.PK-15细胞ANXA8膜联蛋白原核表达及多克隆抗体制备)[J].畜牧与兽医,2022(08):79-85
A类：
ANXA8,pGEX6p1
B类：
PK,膜联蛋白,蛋白原,原核表达,多克隆抗体制备,猪源,His,tag,重组质粒,BL21,DE3,感受态,诱导表达,重组蛋白,SDS,PAGE,blot,SPF,昆明鼠,抗体效价,间接免疫荧光,IFA,特异性结合,大肠杆菌表达,免疫原性,阳性血清,蛋白结构,结构及功能,多抗
AB值：
0.300616
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