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猪流行性腹泻病毒COE蛋白的原核表达及免疫原性分析
文献摘要：
为表达猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中和抗原表位COE蛋白,分析其免疫原性,为PEDV的检测和亚单位疫苗的开发奠定基础.参考GenBank中PEDV COE基因序列,人工合成并经生物信息学综合分析后,将合成的基因片段插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a-COE,将鉴定正确的重组质粒转化至大肠埃希氏菌TransB(DE3)中,用IPTG诱导目的蛋白表达,并进行SDS-PAGE鉴定;然后用纯化的目的蛋白与弗氏不完全佐剂乳化,免疫猪后用ELISA方法检测猪血清中PEDV特异性抗体水平.结果表明,目的蛋白在大肠埃希氏菌TransB(DE3)中获得表达,用His标签纯化得到了与预期大小35 ku相符的COE融合蛋白,经复性、浓缩后的蛋白浓度为1.85 mg/mL.用该蛋白作为亚单位疫苗免疫猪,ELISA方法检测免疫猪产生了高滴度的血清PEDV特异性抗体.表明原核表达的COE蛋白具有良好的免疫原性,可作为候选的亚单位疫苗.
文献关键词：
猪流行性腹泻病毒;中和抗原表位;COE基因;原核表达;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
李雅心;郭涛;胡瑞瑞;王小奎;米桃桃;倪伟;胡圣伟
作者机构：
石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000
文献出处：
引用格式：
[1]李雅心;郭涛;胡瑞瑞;王小奎;米桃桃;倪伟;胡圣伟-.猪流行性腹泻病毒COE蛋白的原核表达及免疫原性分析)[J].动物医学进展,2022(03):1-5
A类：
B类：
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AB值：
0.253863
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