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Ⅳ型禽腺病毒Fiber-2(knob)蛋白的表达及免疫效力评价
文献摘要：
表达Ⅰ群Ⅳ型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2 (knob)蛋白,以制备Fiber-2 (knob)蛋白亚单位疫苗并对其免疫效力进行评价.将FAdV-4 Fiber-2的knob基因克隆至原核表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-Fiber-2 (knob).将重组质粒转化至大肠杆菌BL-21 (DE3),以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,采用镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测纯化后的目的 蛋白.将蛋白抗原与佐剂1∶3乳化,分组免疫100,50,25,0 mg/0.5 L FAdV Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗,攻毒剂量为104.5 ELD50/只,免疫后24 d攻毒,比较不同免疫剂量攻毒保护效果.又制备4批蛋白含量为24 mg/0.5 L FAdV Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗,比较不同批次间免疫效力差异.结果 显示,成功构建pET28a-Fiber-2 (knob)重组质粒,纯化后的蛋白纯度达到90％,质量浓度为3269 mg/L.当攻毒剂量为104.5 ELD50时,FAdV Fiber-2 (knob)蛋白亚单位疫苗攻毒保护率可达到100％(免疫蛋白抗原量为25～100 μg/只),当攻毒剂量为5×103.9 ELD50时,最小免疫蛋白抗原含量为14.4 μg/只时也可产生100％保护.不同批次间FAdV Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗均能刺激机体产生抗体,有效保护SPF鸡抵御FAdV强毒攻击,具有良好的免疫保护效力.
文献关键词：
Ⅳ型禽腺病毒;Fiber-2蛋白;亚单位疫苗;免疫效力
中图分类号：
作者姓名：
程慧敏;刘小晓;林健;刘立新;赵际成;段会娟;王小蕾;范维;刘月焕;钱泓;张强;杨志远
作者机构：
北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100097;浙江海隆生物科技有限公司,浙江绍兴312300;浙江理工大学,浙江杭州310018
文献出处：
引用格式：
[1]程慧敏;刘小晓;林健;刘立新;赵际成;段会娟;王小蕾;范维;刘月焕;钱泓;张强;杨志远-.Ⅳ型禽腺病毒Fiber-2(knob)蛋白的表达及免疫效力评价)[J].中国兽医学报,2022(02):218-222
A类：
B类：
禽腺病毒,Fiber,knob,免疫效力,效力评价,FAdV,蛋白亚单位疫苗,基因克隆,原核表达载体,pET28a,重组质粒,大肠杆菌,BL,DE3,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,重组蛋白表达,镍离子,亲和层析,层析柱,SDS,PAGE,佐剂,乳化,毒剂,ELD50,免疫剂量,保护效果,蛋白含量,蛋白纯度,攻毒保护率,免疫蛋白,抗原含量,SPF,免疫保护,保护效力
AB值：
0.253082
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